[发明专利]一种人BRCA1/BRCA2基因突变检测试剂盒

权利要求书

1.一种人BRCA1/BRCA2基因突变检测试剂盒，其特征在于：包括有扩增乳腺癌易感基因（BRCA1和BRCA2）全部外显子以及各外显子上下游不少于10bp的DNA片段的扩增盒、扩增产物文库构建盒、文库构建连接特异性接头盒、检测试剂盒外包盒和磁珠盒。

2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒的组分和含量包括扩增盒1盒、文库构建盒1盒、接头盒1盒、检测试剂盒外包盒1盒、磁珠盒1盒。

3.检测试剂盒外包盒设计可装下1个扩增盒、1个文库构建盒、1个接头盒；其中1个磁珠盒是单放的，所述检测试剂盒供96人份检测应用，其中扩增盒、文库构建盒和接头盒的保存温度为-25℃~-15℃，磁珠盒的保存温度为2~8℃。

4.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述的扩增盒包括扩增乳腺癌易感基因（BRCA1和BRCA2）全部外显子以及各外显子上下游不少于10bp的 DNA片段的特异性引物混合液以及扩增反应液PM、阳性质控品、阴性质控品。

5.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述扩增盒所述的特异性引物是针对乳腺癌易感基因（BRCA1和BRCA2）序列设计，能够特异性扩增出包含这2个基因的全部外显子以及各外显子上下游不少于10bp的DNA片段的5支引物混合液；所述扩增盒所含的特异性引物P1选自具有SEQ ID NO：1~224所示序列的引物，其中扩增盒所含的特异性引物P2包含具有SEQ ID NO:225~448所示序列的引物，其中扩增盒所含的特异性引物P3包含具有SEQID NO：449~462所示序列的引物。

6.其中扩增盒所含的特异性引物P4包含具有SEQ ID NO：463~482所示序列的引物；其中扩增盒所含的特异性引物P5包含具有SEQ ID NO：483~502所示序列的引物。

7.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述扩增盒的组分和含量包括3支2×扩增反应液PM每支1.3mL、250μL的特异性扩增引物P1、250μL的特异性扩增引物P2、250μL的特异性扩增引物P3、250μL的特异性扩增引物P4、250μL的特异性扩增引物P5、1支阳性质控品1μg、1支阴性质控品1μg、1个外包盒、1个内衬，内衬上设有容器孔，分别放置3支扩增反应液PM、5支特异性扩增引物、1支阳性质控品、1支阴性质控品。

8.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述文库构建盒包含可修复扩增产物的修复液L1、可将修复后的产物两端连接上特异性接头的缓冲液L2、反应液L3和反应液L4、可将连接后的产物富集的反应液L5和通用引物L6。

9.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述文库构建盒的组分和含量包括3支修复液L1每支1.45mL、1支450μL缓冲液L2、1支650μL反应液L3、1支110μL反应液L4、3支反应液L5每支1mL、1支550μL引物L6、1个外包盒、1个内衬。

10.内衬上设有容器孔，分别放置3支修复液L1、1支缓冲液L2、1支反应液L3、1支反应液L4、3支反应液L5、1支引物L6。

11.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述接头盒包含特异性接头96种。

12.每种特异性接头都可以结合文库构建试剂盒使用，连接在目的DNA片段的两端，文库建好上机测序可通过特异性接头序列将样本识别出来得到该样本序列信息；所述接头盒所含的特异性接头选自具有SEQ ID NO：503~598所示序列的接头；所述接头盒的组分和含量包括96种特异性接头每种1支每支2μL、外包盒、内衬。

13.内衬设有容器孔，分别放置96支不同的接头。