[发明专利]辐抗肽突变蛋白及其制备与纯化方法有效
| 申请号： | 201810262142.3 | 申请日： | 2018-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN108484738B | 公开（公告）日： | 2022-03-15 |
| 发明（设计）人： | 葛常辉;杨刚刚;杨晓明;张全义;张全海;詹轶群;王磊;吕中原;王海滨 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院;河南新乡华星药厂;河南师范大学 |
| 主分类号： | C07K14/255 | 分类号： | C07K14/255;C07K1/20;C07K1/18;C12N15/31;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京骥驰知识产权代理有限公司 11422 | 代理人： | 唐晓峰 |
| 地址： | 100850*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 辐抗肽 突变 蛋白 及其 制备 纯化 方法 | ||
1.一种辐抗肽或其突变蛋白的制备与纯化方法，其特征在于，该方法采用丁基疏水层析方法进行纯化，其中所述辐抗肽为辐抗肽蛋白CBLB502，所述突变蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.根据权利要求1所述的制备与纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)体外合成权利要求1所述辐抗肽或其突变蛋白的cDNA，将cDNA连接到pBV220载体中，从而构建表达载体；
2)将表达载体转化感受态大肠杆菌，构建基因表达工程菌，并诱导表达；
3)利用DEAE阴离子交换柱进行粗纯化；
4)使用DEAE阴离子交换柱进行二次纯化；
5)使用丁基疏水层析进行终纯化。
3.根据权利要求2所述的制备与纯化方法，其特征在于，丁基疏水层析是在丁基疏水色谱柱上进行的，上样速度为3L/h～6L/h；洗脱溶液为0.7MNaCl/10mM PB，流速为6L/h。
4.根据权利要求2所述的制备与纯化方法，其特征在于，所述cDNA的核苷酸序列如SEQID NO:1所示。
5.一种辐抗肽突变蛋白，其特征在于，所述突变蛋白由SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成。
6.一种DNA序列，其特征在于，它编码权利要求5所述的辐抗肽突变蛋白。
7.根据权利要求6所述的DNA序列，其特征在于，它由SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列组成。
8.一种表达载体，其特征在于，它含有权利要求7所述的DNA序列。
9.一种宿主细胞，其特征在于，它被权利要求8所述的表达载体转化。
10.根据权利要求9所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞是大肠杆菌JM109。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国人民解放军军事科学院军事医学研究院;河南新乡华星药厂;河南师范大学，未经中国人民解放军军事科学院军事医学研究院;河南新乡华星药厂;河南师范大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201810262142.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
