[发明专利]从虫草蛹中萃取核苷类和氨基酸类活性物质的方法

权利要求书

1.一种从虫草蛹中萃取核苷类和氨基酸类活性物质的方法，其特征在于包括：

(1)将摘除子实体的虫草蛹以丙三醇消毒吹干，将所述虫草蛹置于培养室中于16～20℃、相对湿度为65～70％的黑暗条件下处理36～48h，其中采用包含虫草菌丝的悬浮液喷洗培养室调节并保持湿度；

(2)将经步骤(1)处理后的虫草蛹于-20～-10℃、惰性气氛内保存处理3～6h，之后直接粉碎过60～100目筛，再于室温下加入石油醚脱脂，滤去石油醚得到蛹虫粉末；

(3)在真空条件下将所述蛹虫粉末以1～3℃/min的升温速率从室温升温至60～80℃并保温30～80min，再按照1：10～15的料液质量比将蛹虫粉末加入体积比为1：1：1～1：3：5的N,N-二甲基-N-(2-羟基-乙氧基乙酯)丙酸铵、乙酸乙酯与水的混合溶剂，并以功率为30～50W的超声辅助处理1～3h，之后以4000～6000rpm的转速离心过滤，分离获得滤出物和棕黄色提取液，其后将所述提取液与分子量为2～3万道尔的壳聚糖按照10:1～2的质量比混合，再于50～60℃、0.05～0.09MPa的条件下减压浓缩，获得核苷类活性物质的浓缩物；

(4)将所获滤出物与木瓜蛋白酶、乙醇按照1：0.1～0.2：6～10的质量比混合形成混合体系，调节混合体系的温度为30-55℃、pH值为5.5～6.5，保持10min～25min，其后向混合体系中依次加入纤维素酶、果胶酶、酸性蛋白酶，之后以功率为200～300w的超声波处理0.5～1h；

(5)将步骤(4)中的混合体系加入填充有阳离子交换树脂的层析柱，之后采用氨水进行洗脱，将收集的洗脱液置入-15～-10℃冷冻干燥，收集所获晶体粉末；

(6)以水溶解步骤(5)所获晶体粉末形成溶液，并加入活性炭，于-15～-10℃搅拌过滤后，在室温条件下将滤液以300～350KD的渗透膜渗析过夜，获得氨基酸类活性物质。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(4)中所述纤维素酶、果胶酶和酸性蛋白酶的总用量占所述混合体系质量的1～3％。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤(4)中所述纤维素酶、果胶酶和酸性蛋白酶的质量比为1～3：1～5：1。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(6)中所述活性炭与溶液的用量比为0.5～1g:200mL。