[发明专利]中草药的水性萃出物及其组合物与用途

说明书

本发明公开了中草药的水性萃出物及其组合物与用途，具体涉及多序岩黄耆(Hedysarum polybotrys Hand.‑Mazz.)、泽泻(Alisma plantago‑aquatica(Sam.)Juzep)、苦瓜(Momordica charantia L.)或地龙(Eisenia foetida)的水性萃出物，以及它们的组合，在细胞培养上的新用途。上述中草药的水性萃出物可以取代动物血清在细胞培养基中的部分功能，因而可以降低动物血清在细胞培养基中的用量，由此降低细胞的生产成本，并且降低因使用动物血清所带来的健康风险。本发明也涉及含有所述中草药水性萃出物的抗皱纹和抗皮肤老化的化妆品调配物。

技术领域

本发明涉及中草药的水性萃出物的新用途，特别是单一种中草药的水性萃出物，或是数种中草药的水性萃出物组合，在细胞培养上的新组合物和新用途，以及在对抗皮肤皱纹和皮肤老化上的新组合物和新用途。

背景技术

纤维母细胞存在于动物体内的许多组织中，用于合成胞外基质和胶原蛋白，有维持结缔组织的基本构造的功用，并且在伤口愈合上扮演重要角色。纤维母细胞也会因为受到自己或周围细胞所分泌的细胞激素的作用，而有迁徙及增生的反应。

培养的纤维母细胞有促进组织修补的效果，可应用的范围相当广泛，包括急性及慢性伤口，到美容及重建手术，皆有良好的临床效果。对于伤口的修补来说，纤维母细胞可培养于生物可分解性材质所制成的支架，做成皮肤替代物产品。目前市场上已有许多皮肤替代物，但其安全性及质量极需要被严格规划及管理。例如，细胞来源是否为人体，产品是否无菌，是否有污染，经冷冻后是否仍有活性，如果为非自体来源，是否有排斥或病毒感染的可能等，都是需严格管理的部分。此外，如何将成本缩减至最小，及产品运用性提升至最大，也是相关技术领域人员急切希望解决的课题。

目前医学美容的治疗中，也会以注射的方式将自体的纤维母细胞做为组织填充物，取代传统注射牛胶原蛋白可能有排斥或受感染的风险。注射玻尿酸也有可能会产生皮下过度免疫反应，造成红肿的现象。因此，注射自体纤维母细胞已为目前医学美容界值得发展的治疗方法。注射自体纤维母细胞可改善脸部皱纹及疤痕，并且不需考虑会有排斥等不良反应的风险，且注射活细胞可使治疗效果延长，减少治疗的次数(Weiss,R.A.et al.,Dermatol.Surg.33(3):263-268)。

因应纤维母细胞在自体注射上的应用，在有效培养人体纤维母细胞的前提下降低胎牛血清(fetal bovine serum，简称FBS)的用量有其必要性。目前，纤维母细胞主要是以含有10％FBS的达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)为培养液，其中胎牛血清用于提供纤维母细胞成长所需要的养分及生长因子。但是，当使用纤维母细胞制剂时，无论是以注射方式或是以中胚层疗法(mesotherapy)方式进行，都需要使其进入病人体内，而胎牛血清中的成分可能在培养的过程中进入细胞内，安全性难以估测，可能有造成排斥、过敏、甚至疾病感染的风险。况且，胎牛血清单价甚高。因此，在纤维母细胞的培养过程中减少胎牛血清的用量，为目前相当重要的议题。目前有些研究是以自体抽血所分离出的血清做为培养纤维母细胞培养液的营养来源。虽然这个方法较为安全，但培养纤维母细胞需要大量的培养血清。如果想要治疗的病人有贫血现象，就无法取得大量血分离出足够血清。何况在临床上，纤维母细胞可能需要多次继代，此时血清的需求量更高。在上述情况下，病人可能无法顺利进行治疗。因此，业界对于能够促进纤维母细胞生长的胎牛血清替代品，或是能够减少胎牛血清用量的细胞培养补充剂，存在有殷切的需求。

非动物来源的细胞培养补充剂具有疾病传染风险低、成本低廉、来源丰富的优势。法瑞汉蒂等人提出可以使用大豆和米的植物蛋白水解产物做为人类皮肤纤维母细胞的培养补充剂(Farizhandi,A.A.K.et al.,Adv.Environ.Biol.8(3 Spec.Issue),838-843)。WO2004/083400A2公开了一种用于培养动物细胞的培养基补充剂，它是由落花生、榛果、杏仁等植物种子萃取而得，可以供用做为胎牛血清的替代品或补充品。日本专利申请第2-49579号提议使用面筋的水解产物和酵母菌萃出物搭配基础培养基，用于培养动物细胞。