[发明专利]一种高效产细菌纤维素的培养基有效
申请号: | 201810270992.8 | 申请日: | 2018-03-29 |
公开(公告)号: | CN108441528B | 公开(公告)日: | 2022-03-25 |
发明(设计)人: | 马宇平;张展;叶建斌;冯颖杰;张婷婷;杨宗灿;刘向真;郝辉 | 申请(专利权)人: | 河南中烟工业有限责任公司 |
主分类号: | C12P19/04 | 分类号: | C12P19/04;C12R1/02 |
代理公司: | 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 | 代理人: | 时立新 |
地址: | 450000 河南*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高效 细菌 纤维素 培养基 | ||
1.一种细菌纤维素制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)制备种子液,
将发酵菌株接种于种子培养基中,28℃培养24h制备种子液;
所述发酵菌株为:保藏号ATCC23767的木醋杆菌菌株;
所述种子培养基,每升配方为:多聚蛋白胨 5 g,酵母提取物 5 g,葡萄糖 5 g,甘露醇5 g, 7H2O·MgSO4 1 g,去离子水定容至1 L,灭菌后,加入5 mL无水乙醇;
(2)发酵制备细菌纤维素,
将步骤(1)中种子液按10%接种量,接种到细菌纤维素制备用培养基中;
先30℃静置1 d,再30℃、180rpm振荡培养2d,再30℃静置4d;
所述细菌纤维素制备用培养基,通过如下步骤制备获得:
(a)制备烟草浸提液,取烟草原料,加入烟草原料6倍质量的水,在70℃浸提60min,收集浸提液自然冷却到室温后备用;
(b)酶解处理浸提液,在步骤(a)的浸提液中加入淀粉酶和蛋白酶进行酶解处理,酶解处理后,煮沸灭活后备用;
每升烟草浸提液中,淀粉酶和蛋白酶的加入量均以100kU计,30~50℃酶解处理60 min;
(c)添加营养物,将步骤(b)酶解处理后浸提物进行离心,取上清,以质量体积百分比计,每毫升烟草浸提液含:0.15% MgSO4、0.01% FeSO4、5.0% 蛋白胨、5.0% 酵母膏,灭菌后加入4%无水乙醇;
(3)收集并处理获得细菌纤维素成品,
收集步骤(2)中发酵液表面的细菌纤维素膜,洗涤、干燥后即为细菌纤维素成品。
2.如权利要求1所述细菌纤维素制备方法,其特征在于,步骤(3)中,所述洗涤具体为:先用去离子水先洗涤1~2遍,再用0.1%的NaOH洗涤3~4次,最后用去离子水清洗至pH 7.0;所述干燥为真空冷冻干燥。
3.利用权利要求1或2所述细菌纤维素制备方法所制备细菌纤维素。
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