[发明专利]一种诱导玉叶金花胚芽再生的组培快繁方法

说明书

本发明公开了一种诱导玉叶金花胚芽再生的组培快繁方法，其主要技术要点是以玉叶金花种子为外植体，诱导种子萌芽，然后诱导不定芽，再壮苗生根后进行炼苗驯化、移栽上盆的繁殖方法。采用本发明提供的玉叶金花胚芽再生的组培快繁技术进行批量生产，再生周期短，繁殖系数高，适用于工厂化规模育苗。

技术领域

本发明涉及玉叶金花领域，具体为一种诱导玉叶金花胚芽再生的组培快繁方法。

背景技术

玉叶金花，属茜草科玉叶金花属植物，开花时，叶状雪白的萼片及金黄色的花冠显现在树冠上，金花玉叶，因花色鲜艳奇特，有较高的观赏价值；玉叶金花的藤蔓和叶片有清热解暑，凉血解毒的作用，主治感冒发热、咽喉肿痛、暑湿泄泻、肾炎水肿、肠炎腹泻、疮疡脓肿,跌打损伤、蛇虫咬伤等症，有较高的药用价值。

国内关于玉叶金花利用种胚诱导丛生芽未见报道，目前仅有彭光天《玉叶金花的组织培养和植株再生》(2001)、张文泉《珍稀濒危植物异形玉叶金花组织培养初步研究》(2016) 以玉叶金花幼嫩茎段为外植体，研究不同组合的激素组合及外源物对玉叶金花愈伤组织诱导及分化的影响，愈伤诱导芽分化率分别为38.7％和50％，其诱导分化率极低。

发明内容

本发明的目的提供一种诱导玉叶金花胚芽再生的组培快繁方法，选用玉叶金花种子为外植体，极大的提高了诱导丛生芽增殖系数，达到繁殖速度快，进而实现工厂化规模育苗的目的。

本发明采用这样的技术方案来实现：一种诱导玉叶金花胚芽再生的组培快繁方法，包括以下步骤：

1)选择成熟的果实，剥去果皮，待果肉风干后取出种子，种子在5-8℃的冰箱内存放一周，再进行消毒灭菌处理；

2)步骤1)得到的种子接种到培养基中进行培养，培养温度为温度25±1℃、光照12h/d、光照强度2000-3000lx，待种子萌发；

3)将步骤2)种子萌发得到的幼苗分为叶片、根、茎段三种材料，将三种材料分别接入培养基中进行培养，培养温度25±1℃、光照12h/d、光照强度2000-3000lx；诱导不定芽；

4)将步骤2)诱导的3-5cm单芽转入壮苗生根培养基进行培养，再进行炼苗移栽；

通过上述步骤，实现玉叶金花胚芽再生的组培快繁。

进一步地，步骤1)中杀菌时，先将种子用体积百分数为75％的酒精处理30s，然后无菌水冲洗2-3次，再在HgCl₂稀溶液中浸泡15min，最后用无菌水冲洗3-4次即可。HgCl₂稀溶液采用1g HgCl₂加入1000ml水中配制而成。

进一步地，步骤2)中的培养基为1/2MS+蔗糖30g/L+琼脂6g/L，pH值为5.8-6.0。

进一步地，步骤3)中的培养基为1/2MS+6-BA1.5mg/L+IBA0.1mg/L+LH100mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L，pH值5.8-6.0。

进一步地，步骤3)中，将幼苗的根切开，茎分切为1-2节间的茎段、叶片以主脉为对称轴切成长0.5-1.0cm平方小块，并沿主脉横切2刀处理，得到叶片、根、茎段三种材料。在叶片上进行横切，制造创伤有利愈伤产生。

进一步地，步骤4)中的培养基为1/2MS+NAA0.2mg/L+蔗糖15g/L+琼脂6g/L，PH值5.8-6.0。

进一步地，步骤4)中壮苗生根培养基培养时间为20d，炼苗移栽时用土采用园土、砂土和泥炭土按照体积比3：2：1配制。

本发明具有以下有益效果：