[发明专利]一种中药组合发酵物醇提成分的制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种中药组合发酵物及其醇提成分的制备工艺以及该醇提成分的用途。本发明采用球孢白僵菌发酵全蝎、白术和白头翁的混合物，后经冷冻干燥、50%乙醇提取得醇提成分。本发明制备工艺简单，制得的发酵物醇提成分对RSV、EV71、COX‑B2、HSV等病毒的抑制作用效果均优于利巴韦林。该醇提成分可制成胶囊、片剂、肺吸入粉雾剂及鼻用吸入粉雾剂等剂型用于抗病毒治疗。

技术领域

本发明涉及中医药技术领域，特别是涉及一种抗病毒的中药组合物，本发明还涉及该组合物的制备方法和应用。

背景技术

病毒感染能引起多种疾病，严重危害人类的健康和生命。据不完全统计，约60%的流行性传染病是由病毒感染引起的。目前，被国际病毒分类委员会确认的、能使人类致病的病毒有1200多种。截至2012年4月底，全世界批准临床使用的抗病毒药物有63个品种，而这些药物只能预防和治疗少数几种病毒所致的疾病。因此，研制抗病毒新药任务紧迫。本研究采用发酵技术对传统中药全蝎、白术、白头翁的混合物进行加工，后经冻干、醇提等工艺得到有效成分。药理实验证实，该提取物对正常细胞低毒，对RSV、EV71、COX-B2、HSV病毒的抑制作用优于同剂量的利巴韦林。该提取物可制备成胶囊、片剂、肺吸入粉雾剂及鼻用吸入粉雾剂等剂型用于抗病毒治疗，对其进行完善，补充相关材料即可按新药申报，预期投入市场后经济和社会效益显著。

发明内容

本发明的目的在于提供一种中药组合发酵物的醇提成分及其在抗病毒中的应用。本发明制得的醇提成分可用于抑制RSV、EV71、COX-B2、HSV等病毒。

为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案是：

（1）球孢白僵菌适量，无菌接种于灭菌的PDA培养基上，培养7天，将二代培养的菌种用无菌蒸馏水稀释成1×10⁸个孢子/mL；（2）精密称取灭菌的全蝎粉、白术粉和白头翁粉各10.000 g于培养皿中，并加入上述孢子的稀释液，在温度为25℃、湿度为95%以上的条件下，于恒温恒湿培养箱中发酵7 d，长满菌丝后停止发酵；（3）将其取出，放入冻干机中，保持压力为10 Pa，冷阱温度为-50℃~-60 ℃，冷冻干燥60~72 h；（4）精密称取发酵全蝎、白术、白头翁粉2.000 g，按照药与50%乙醇1:40的比例，在80℃水浴锅中，分两次提取2.5 h；（5）将提取液抽滤，抽滤得到的液体为醇提液，将其放在45℃水浴中蒸干，即得50% 醇提成分；

上述的中药组合发酵物醇提成分在抗病毒中的应用。实验结果表明，本发明制备的全蝎、白术、白头翁混合发酵物醇提成分对RSV、EV71、COX-B2、HSV等病毒有显著的抑制作用；

与现有技术相比，本发明的有益效果是：（1）本发明制备的中药组合发酵物醇提成分对RSV、EV71、COX-B2、HSV等病毒有显著的抑制作用。0.25 mg/ml浓度时对HSV病毒的抑制率达到48.35 %，而相同浓度的利巴韦林对HSV病毒的抑制率仅为 38.03 %。这一结果充分地证明全蝎白术白头翁混合发酵物醇提成分具有较强的抗病毒活性。药理实验同时证明，该提取物对MA104细胞毒性较低，药物浓度2 mg/ml时，24小时后MA104细胞的存活率为23.88 %。

本发明的全蝎白术白头翁混合发酵物醇提成分制备工艺简单合理

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明；

实施例1 中药组合发酵物制备工艺；

采用以下方法制备中药组合发酵物；