[发明专利]人源化RP215单克隆抗体的嵌合抗原受体构建体及核酸分子与应用

权利要求书

1.人源化RP215单克隆抗体的嵌合抗原受体构建体，其特征在于：为Signal peptide-hRP215 scFv-CD8-4-1BB-CD3Z-2A-IL7，其氨基酸序列如序列表8所示；多肽从N末端至C末端包含：

信号结构域，该信号结构域为白细胞介素2信号传导氨基酸序列；

抗原结合结构域，该抗原结合结构域为hRP215 scFv；

铰链结构域，该铰链结构域为CD8分子的铰链结构域；

跨膜结构域，该跨膜结构域为CD8分子的跨膜结构域；

共刺激结构域，该共刺激结构域为4-1BB共刺激结构域；

细胞内T细胞信号域，该细胞内T细胞信号域为CD3 zeta亚基域；

自切割肽，该自切割肽为2A自切割肽；

细胞因子结构域，该细胞因子结构域为IL-7。

2.编码根据权利要求1所述的人源化RP215单克隆抗体的嵌合抗原受体构建体的核酸分子，其特征在于：如序列表7所示核苷酸序列。

3.一种分离的核酸分子，其特征在于：编码权利要求1所述构建体。

4.根据权利要求3所述的分离的核酸分子，其特征在于：编码权利要求1中所述hRP215scFv的重链的核苷酸序列如序列表2所示。

5.根据权利要求3所述的分离的核酸分子，其特征在于：编码权利要求1中所述hRP215scFv的轻链的核苷酸序列如序列表中序列4所示。

6.根据权利要求3所述的分离的核酸分子，其特征在于：编码权利要求1中所述信号结构域的核苷酸序列如序列表中序列9所示，其用于引导所表达的蛋白质到细胞膜上，其中信号结构域为白细胞介素2信号序列。

7.根据权利要求3所述的分离的核酸分子，其特征在于：编码权利要求1中所述铰链结构域和跨膜结构域的核苷酸序列如序列表中序列10所示，其用于连接所表达蛋白质的细胞外人源化RP215 scFv和所表达蛋白质的细胞内共刺激结构域和信号结构域，其中铰链和跨膜结构域为CD8的铰链和跨膜结构域。

8.根据权利要求3所述的分离的核酸分子，其特征在于：包含共刺激结构域，编码共刺激结构域的核苷酸序列为序列表中序列11所示，其用于共刺激T细胞以提高嵌合抗原受体构建体的体内持久性，其中共刺激结构域为4-1BB的共刺激结构域。

9.根据权利要求3所述的分离的核酸分子，其特征在于：编码权利要求1中所述信号结构域的核苷酸序列如序列表中序列12所示，其用于T细胞内信号传导，其中信号结构域为CD3分子的ζ亚基。

10.根据权利要求3所述的分离的核酸分子，其特征在于：包含自切割肽，编码自切割肽的核苷酸序列如序列表中序列13所示，其中自切割肽为2A自切割肽。

11.根据权利要求3所述的分离的核酸分子，其特征在于：编码权利要求1中所述细胞因子结构域的核苷酸序列如序列表中序列14所示，其中细胞因子结构域为IL7结构域。

12.一种用于在免疫细胞中转染和表达人源化RP215 scFv的载体，其特征在于：此载体包含权利要求3-11任一项所述核酸分子。

13.根据权利要求12所述载体，其特征在于：还包含质粒。

14.一种适于转染到T细胞或自然杀伤细胞的慢病毒载体，其特征在于：具有权利要求3-11任一项所述核酸分子。

15.一种免疫细胞，其特征在于：包括T细胞或自然杀伤细胞，包含权利要求3-11任一项所述核酸分子，权利要求12-13任一项所述载体或权利要求14所述慢病毒载体。