[发明专利]一种用于厕所和垃圾站除臭菌株的筛选及培育方法

说明书

本发明公开了一种用于厕所和垃圾站除臭菌株的筛选及培育方法，所述方法包括：准备平板、采样、富集培养、菌种分离、菌种纯化、菌种驯化、菌种鉴定、菌种保存；本发明的方法用糖水自然暴露在空气中，自然收集空气微生物，培养7d后，分离出一株菌株，利用除臭菌株的发酵液装入高压喷雾装置内对厕所与垃圾站进行高压喷洒处理，垃圾填埋场中臭气去除达到94.1%；本发明的方法简单易行，效果好，同时此菌株能明显抑制其他杂菌生长。

技术领域

本发明涉及环保领域，尤其涉及通过微生物技术进行厕所和垃圾站中臭气去除菌株的筛选培养。

背景技术

随着我国城市化进程的加快，城市人口日益增多，随之而来的是城市生活垃圾高速增加，据不完全统计，近年来我国垃圾年增长率达到10%以上，每年产生垃圾近1. 5亿吨，目前，国内城市生活垃圾积存量已高达70亿吨，其中80%一90%来自大中城市，但其处理率仅为50%左右，全国600多座城市中己有三分之二的大中城市陷入生活垃圾的包围之中，目前，我国城市生活垃圾以“末端处理”为主，主要采取填埋法、焚烧法和堆肥法三种处理技术，但垃圾在转运、堆放处理的过程中产生大量恶臭气体，严重困扰着居民的日常生活和身体健康，经气相色谱检测表明，城市生活垃圾臭气的主要成分为氨气；现在一些公共厕所由于使用率比较高，保洁人员又疲于清洁，常常也会产生大量刺鼻的臭气。

微生物除臭技术是利用微生物的生理代谢活动降解恶臭物质，达到除臭的目的，与其他除臭方法相比，微生物除臭法具有投资少、处理费用低、维护管理简单、操作方便等优点；现有的一般复合微生物除臭剂也存在各菌株共存性差，菌种稳定性差，降解硫化氢与氨的效果不佳，且不能抑制其他杂菌生长，这些都限制了复合微生物除臭剂的进一步的应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于厕所和垃圾站除臭菌株的筛选及培育工艺，其培育效率远高于现有的培育方法，克服现有技术的缺点。

本发明通过以下技术实现其发明目的：一种用于厕所和垃圾站除臭菌株的筛选及培育工艺，其特征在于，所述方法包括：

步骤（1）、准备平板：配制PDA培养基，121℃灭菌25 min，冷却后倒入灭菌好的平板中；

步骤（2）、采样：用移液枪取用糖水自然暴露在空气中，自然收集空气微生物，培养7d后的培养液接种到含有酵母富集培养基的三角瓶中进行富集培养；

步骤（3）、富集培养：将三角瓶置28℃恒温摇床上，振荡培养2~3d；

步骤（4）、菌种分离：用划线分离法用接种环挑取富集培养后的三角瓶中的菌液，在PDA平板表面用四区法划线分离出单菌落；

步骤（5）、菌种纯化：将分离出的单菌落再次划线分离，取形态完整生长较好的菌落，用接种环挑取出单菌落放入试管中30℃培养2d后放入4℃冰箱保存；

步骤（6）、菌种驯化：以氨水为唯一氮源配置基础培养基，灭菌倒入平板中，将单菌落接入平板中，选取长势良好的菌种，逐级驯化三次；选出能以氨水为氮源长势菌落较大的菌种；

步骤（7）、菌种鉴定：经过显微镜400倍进行形态观察，将分离纯化得到的有效菌株送公司测序，初步确定为酵母菌，经分子标记技术鉴定，确定为噬乙醇假丝酵母；

步骤（8）、菌种保存：将驯化好的菌种接种到含PDA培养基的试管斜面中放入4℃冰箱保存。

进一步地，所述方法还包括：利用除臭菌株的发酵液装入高压喷雾装置内对厕所与垃圾站进行高压喷洒处理。

另一方面，本发明还提供一种高效的除臭菌株，该菌株的DNA序列如序列表中SEQID No. 1中所示。

技术效果