[发明专利]一种集成细胞捕获、三维基底培养及生物分析的芯片

权利要求书

1.一种集成细胞捕获、三维基底培养及生物分析的芯片，其特征在于该芯片包括三层结构，下层是含有微纳结构的细胞三维培养基底，中层是微孔阵列穿孔膜，上层是生物分析基底。

2.根据权利要求1所述的集成细胞捕获、三维基底培养及生物分析的芯片，其特征在于所述细胞三维培养基底材料包括但不限于硅片、PDMS、水凝胶、聚合物支架、三维聚苯乙烯支架、聚偏二氟乙烯膜、硝酸纤维素膜或各种孔径的滤纸。

3.根据权利要求1所述的集成细胞捕获、三维基底培养及生物分析的芯片，其特征在于所述微孔阵列穿孔膜由弹性材料制成，所述弹性材料包括但不限于PDMS及各种修饰后的PDMS。

4.根据权利要求3所述的集成细胞捕获、三维基底培养及生物分析的芯片，其特征在于所述微孔阵列穿孔膜含阵列分布的穿孔，穿孔形状包括正多边形、矩形或圆形，穿孔数目为1～1000000个/cm²，穿孔尺寸为1μm～1cm，穿孔膜厚度为1μm～1mm。

5.根据权利要求1所述的集成细胞捕获、三维基底培养及生物分析的芯片，其特征在于所述生物分析基底包括但不限于多聚赖氨酸玻璃、环氧树脂玻璃、或者包被了蛋白、抗体或DNA的玻片、或者包被了蛋白阵列、抗体阵列或DNA阵列的玻片。

6.根据权利要求1所述的一种集成细胞捕获、三维基底培养及生物分析的芯片的应用，其特征在于该芯片可用于多种细胞分析、多种细胞的单细胞分析、多种细胞的多重生物分子分析或多种细胞的单细胞多重生物分子分析。

7.根据权利要求6所述的一种集成细胞捕获、三维基底培养及生物分析的芯片的应用，其特征在于所述的多种细胞包括但不限于哺乳细胞、动物细胞。

8.根据权利要求1所述的一种集成细胞捕获、三维基底培养及生物分析的芯片的应用，其特征在于所述的多重生物分子分析，包括但不限于分泌蛋白、细胞因子、多肽、肽段、核酸、细胞表面蛋白、细胞表面受体、激素、抗原、生长因子或外泌体的分析。

9.根据权利要求8所述的根据权利要求1所述的一种集成细胞捕获、三维基底培养及生物分析的芯片的应用，其特征在于所述的多重生物分子分析中的多重分析包括从1到100个指标的分析。

10.根据权利要求8所述的根据权利要求1所述的一种集成细胞捕获、三维基底培养及生物分析的芯片的应用，其特征在于检测分泌蛋白的应用方法具体为：

在多聚赖氨酸玻片上包被上捕获抗体；将细胞三维培养基底和微孔阵列穿孔膜组装起来；将细胞以一定密度种在芯片上；盖上包被了捕获抗体的玻片，用夹具固定，置培养箱中培养一定时间；显微镜拍照；卸下夹具，夹心免疫法进行后续分泌蛋白的检测。