[发明专利]墨鱼高F值寡肽以及其制备方法在审
申请号: | 201810283088.0 | 申请日: | 2018-04-02 |
公开(公告)号: | CN108517004A | 公开(公告)日: | 2018-09-11 |
发明(设计)人: | 葛啸虎;陈海佳;王一飞;王小燕 | 申请(专利权)人: | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C12P21/02;C07K1/16;C07K1/14 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 欧阳柏乐 |
地址: | 510000 广东省广州市广州开发*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高F值寡肽 肽段 制备 肽段序列 | ||
1.一种墨鱼高F值寡肽,其特征在于,所述高F值寡肽包含若干如下肽段:
肽段M1的序列为SEQ ID NO.1:Tyr-Cys-Trp-Ala-Val-Lys-Phe-Leu-Tyr;
肽段M2的序列为SEQ ID NO.2:Leu-Val-Thr-Arg-Tyr-Gln-Val。
2.一种墨鱼高F值寡肽的制备方法,其特征在于,包括下述步骤:
将墨鱼研磨,然后将研磨后的墨鱼按1:1-1:1.5加入蒸馏水中,得到搅碎的墨鱼,并向搅碎的墨鱼中接种质量份数为1%-2%纳豆芽孢杆菌,然后控制发酵温度35℃-45℃,发酵78h-96h得发酵液;
将活性炭装入层析柱中,所述发酵液流经装有活性炭的层析柱,然后干燥制得寡肽粉末A;
凝胶层析,干燥得寡肽粉末B;
高效液相色谱梯度洗脱,收集洗脱液,干燥,制得墨鱼高F值寡肽。
3.根据权利要求2所述的墨鱼高F值寡肽的制备方法,其特征在于,在搅碎的墨鱼中接种质量份数为1%-2%纳豆芽孢杆菌后,再向所述搅碎的墨鱼中接种0.8%-1.2%胃蛋白酶。
4.根据权利要求3所述的墨鱼高F值寡肽的制备方法,其特征在于,所述活性炭的粒径为100目-200目。
5.根据权利要求2所述的墨鱼高F值寡肽的制备方法,其特征在于,所述滤液在所述层析柱的流速为0.6mL/min-1.2mL/min。
6.根据权利要求2所述的墨鱼高F值寡肽的制备方法,其特征在于,所述活性炭中掺杂纳米氧化锌或纳米氧化锰中的一种或多种。
7.根据权利要求6所述的墨鱼高F值寡肽的制备方法,其特征在于,按重量份计,所述纳米氧化锌的加入量为0.6%-1.0%、所述纳米氧化锰的加入量为2.0%-4.0%。
8.根据权利要求2所述的墨鱼高F值寡肽的制备方法,其特征在于:所述的凝胶层析中选用洗脱液为超纯水,超纯水的流速为0.32mL/min-0.45mL/min,每1.8-2.2min收集1管。
9.根据权利要求2所述的墨鱼高F值寡肽的制备方法,其特征在于,所述高效液相色谱纯化的条件为:采用梯度洗脱,洗脱时间、洗脱液成份及其百分比和流速依次为:0-15min,乙腈35%,超纯水65%,流速为0.12-0.22mL/min;16-50min,乙腈80%,超纯水20%,流速为0.35-0.52mL/min;51-70min,乙腈20%,超纯水80%,流速0.64-0.70mL/min。
10.根据权利要求2所述的墨鱼高F值寡肽的制备方法,其特征在于,所述干燥为冷冻干燥。
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