[发明专利]一种小白菜小孢子分化培养基配方

说明书

本发明提供了一种小白菜小孢子分化培养基，其配方含KNO₃、苯乙酸钾、氯化2‑羟乙基三甲铵、MgSO₄∙7H₂O、CaCl₂∙2H₂O、(NH₄)₂SO₄、NaH₂PO₄∙H₂O、Na₂‑EDTA、FeSO₄∙7H₂O、MnSO₄∙4H₂O、NiNO₃、H₃BO₃、ZnSO₄∙7H₂O、KI、Na₂MoO₄∙2H₂O、CuSO₄∙5H₂O、CoCl₂∙6H₂O、RNA‑Na、谷氨酰胺、维生素B1、维生素B6、2‑吗啉乙磺酸、烟酸、叶酸、生物素、肌醇、山梨醇、甘氨酸、脯氨酸、蔗糖、植物凝胶、NAA、吲熟酯、调钙酸钙、多效唑、秋水仙素、水解蛋白和活性炭。本发明可显著提高小白菜小孢子愈伤绿苗再生率。

技术领域

本发明涉及一种小白菜小孢子分化培养基配方，具体涉及一种可显著提高小白菜小孢子愈伤绿苗再生效率、具有重要应用价值的小白菜小孢子分化培养基配方，属于蔬菜培育科学技术领域。

背景技术

小白菜（Brassica campestris L.ssp. chinensis）属于十字花科芸薹属芸薹种白菜亚种，又称不结球白菜、青菜、小油菜，包括白菜（普通白菜）、菜心、乌塌菜、薹菜等多个变种，原产我国，是我国各地普遍栽培的蔬菜作物。由于其食用性强，营养丰富，品质优良，风味各异，深受人们喜爱，而且小白菜生产期短，适应性强，生产成本低，可常年栽培，周年供应，生产采收方便，在各大中城市蔬菜市场上占有重要位置。近年来，东南亚及欧美的一些国家也广泛引种，已逐渐成为世界性蔬菜。

随着小白菜国际国内市场需求的紧俏，优质、抗病、丰产的小白菜良种培育成为蔬菜培育科研人员的研究主题之一。小白菜是异花授粉植物，杂交优势非常明显，目前主要采用杂交育种方法进行小白菜新品种培育。传统杂交育种方法存在周期长、效率低等突出问题，育成一个稳定优良自交系一般需要6-8年，甚至更长时间，选育自交系非常费事、费工。近年来随着人工成本的增加，常规育种的不足在实际工作中日渐明显。因此，迫切需求小白菜育种的新途径和新方法。

近几年来随着单倍体育种在芸苔属农作物上的应用研究, 充分证明单倍体育种与常规多代自交获得纯系相比，具有周期短、效率高、纯系稳定等特点。游离小孢子培养是单倍体育种技术中快速获得纯系的一种有效方法，同单倍体育种技术中的花药培养相比，游离小孢子培养消除了小孢子和花药壁、级链层细胞之间可能存在的营养竞争，往往培养成功的基因型多，胚状体诱导频率也高，同时去除了花药壁、级链层细胞等体细胞再生植株的干扰，从而可以提高选择的准确性，提高育种效率和品种质量。

在芸薹属作物中，先后对油菜、芥菜、甘蓝、大白菜、小白菜和花椰菜等进行了游离小孢子培养并获得了再生植株。国内外学者对影响芸薹属作物游离小孢子培养的一些因素进行了研究，取得了显著的进展。小白菜游离小孢子培养最早见于曹鸣庆等的报道，通过游离小孢子培养首先获得了小白菜小孢子胚状体，李岩等和蒋武生等获得了类似的结果，此后相关报道甚少，主要原因是小孢子胚性愈伤诱导率和分化率低而不稳定，直接限制了小白菜游离小孢子培养技术在育种上的应用。