[发明专利]一种生物介质稳定的双敏感型的癌症联合治疗系统及构建方法

权利要求书

1.一种生物介质稳定的双敏感型的癌症联合治疗系统，其特征在于，双敏感型癌症联合治疗系统以介孔硅为基体，在介孔硅上同时负载抗癌药物与细胞凋亡肽，并在介孔硅的最外层包覆牛血清蛋白；

介孔硅通过以下过程负载细胞凋亡肽：

介孔硅与3-巯基丙基三甲氧基硅烷反应得到巯基修饰的介孔硅MSN-SH，再与S-(2-氨基乙硫基)-2-硫代吡啶盐酸盐反应得到表面连接有双硫键的介孔硅MSN-SS-NH₂，再与溴代丙炔、三乙胺反应炔基修饰双硫键的介孔硅MSN-SS-alkyne，再与端部有叠氮基团的细胞凋亡肽N₃-KLA、CuSO₄·5H₂O与抗坏血酸钠反应得到连接接有细胞凋亡肽的介孔硅MSN-SS-KLA；在介孔硅的最外层包覆牛血清蛋白的方法为：

将负载抗癌药物和细胞凋亡肽的介孔硅DOX@MSN-SS-KLA分散到水中，滴加牛血清蛋白BSA室温搅拌过夜。

2.根据权利要求1所述的癌症联合治疗系统，其特征在于，细胞凋亡肽通过还原敏感的双硫键连接到介孔硅的表面上。

3.根据权利要求1或2所述的癌症联合治疗系统，其特征在于，所述抗癌药物为盐酸阿霉素DOX·HCl，并负载在介孔硅的孔道内。

4.根据权利要求1或2所述的癌症联合治疗系统，其特征在于，介孔硅的粒径为50～100nm。

5.如权利要求1至4任一所述的癌症联合治疗系统的构建方法，包括以下步骤：

(1)制备介孔硅：以正硅酸四乙酯、三乙胺和十六烷基三甲基氯化铵CTAC为原料制备CTAC修饰的介孔硅CTAC@MSN；

(2)制备表面双硫化的介孔硅：室温下将CTAC@MSN与3-巯基丙基三甲氧基硅烷在甲醇中混合搅拌反应，离心洗涤后干燥，再抽洗掉CTAC得到巯基修饰的介孔硅MSN-SH，然后与S-(2-氨基乙硫基)-2-硫代吡啶盐酸盐在甲醇中混合反应，再离心、洗涤并干燥得到表面连接有双硫键的介孔硅MSN-SS-NH₂；

(3)制备炔基修饰的双硫化的介孔硅：室温将MSN-SS-NH₂分散到甲醇中，滴加溴代丙炔、三乙胺反应，使炔基替代氨基连接到双硫键上，得炔基修饰双硫键的介孔硅MSN-SS-alkyne；

(4)负载细胞凋亡肽：室温将MSN-SS-alkyne分散到甲醇中，依次加入端部有叠氮基团的细胞凋亡肽N₃-KLA、CuSO₄·5H₂O与抗坏血酸钠，氮气氛围下反应，然后离心、洗涤得到连接接有细胞凋亡肽的介孔硅MSN-SS-KLA；

(5)负载抗癌药物：将MSN-SS-KLA分散到甲醇中，加入抗癌药物后剧烈搅拌过夜，待负载的抗癌药物为DOX·HCl，然后透析得到负载抗癌药物的介孔硅DOX@MSN-SS-KLA；

(6)牛血清蛋白包覆：将DOX@MSN-SS-KLA分散到去离子水中，然后滴加牛血清蛋白BSA，室温搅拌过夜后离心、洗涤得到BSA包覆的介孔硅DOX@MSN-SS-KLA/BSA。

6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，步骤(2)中制备巯基修饰的介孔硅MSN-SH时CTAC@MSN、甲醇和3-巯基丙基三甲氧基硅烷质量比1:100～150:3～5，反应时间24～36h。

7.根据权利要求5或6所述的构建方法，其特征在于，步骤(2)中制备氨基修饰的双硫化的介孔硅MSN-SS-NH₂时MSN-SH、甲醇和S-(2-氨基乙硫基)-2-硫代吡啶盐酸盐的质量比为1:200～300:1～4，反应时间为24～36h。

8.根据权利要求5述的构建方法，其特征在于，步骤(3)中MSN-SS-NH₂、甲醇、溴代丙炔和三乙胺的质量比为1:200～300:8.0:0.2～0.5，反应时间为24～36h。