[发明专利]一种体外受精培养液及其制备方法

说明书

本发明属于辅助生殖领域，具体涉及一种体外受精培养液及其制备方法。用于制备体外受精培养液的组合物由白藜芦醇、还原型谷胱甘肽和卵磷脂组成；所述白藜芦醇、还原型谷胱甘肽和卵磷脂的摩尔比为5～50：100～250：8000～12000。本发明的体外受精培养液可以提供稳定的受精环境，去除细胞产生的活性氧和精子在运动过程中产生的活性氧自由基，减少活性氧对精子和卵子的伤害，还能提高精子活力，修复细胞损伤，提高受精率和囊胚形成率，囊胚形成率≥90％。

技术领域

本发明属于辅助生殖领域，具体涉及一种体外受精培养液及其制备方法。

背景技术

体外受精(In Vitro Fertilization)是指人的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术，英文简称为IVF。

精子和卵子在体外受精，需要受精培养液提供稳定的受精环境。精子和卵子在体外培养过程中会产生过量的活性氧对体外受精是有害的，精子特异性的细胞结构使得精子对活性氧更敏感，更容易收到活性氧的损害。活性氧的危害主要在于破环精子细胞形态，影响受精过程中的顶体反应。

在辅助生殖技术中需采集良好的精子和母体的卵细胞进行受精和先期培养，该培养过程与受精液密切相关，受精液的质量优劣决定是否能得到受精卵。体外受精液的目的主要是提供精子、卵子存活的营养和受精卵发育的营养，以及为精子、卵子及受精卵创建合理的成活和生长发育的环境。

目前使用的受精液调配的营养不全，或其物理或化学指标过余宽，在培养过程中容易使精子或卵细胞死亡、或精子获能不足活力较低、或卵细胞生存受到影响，如在精子活力试验中，精子保持活力的比率较低，或其比率接近或低于合格标准(保持活力率≥75％)。有些受精液的稠度较高，稳定性差其含有有害成份和炎细胞去除不干净，严重影响受精卵的发育成长。

目前，IVF全系培养液全靠进口，价格昂贵，为填补国内空白，研发辅助生殖培养液，逐步替代进口，降低辅助生殖的成本。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种体外受精培养液及其制备方法，本发明的体外受精培养液，可以提供稳定的受精环境，减少活性氧对精子和卵子的伤害，还能提高精子活力，修复细胞损伤，提高受精率和囊胚形成率。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

用于制备体外受精培养液的组合物，所述组合物由白藜芦醇、还原型谷胱甘肽和卵磷脂组成；所述白藜芦醇、还原型谷胱甘肽和卵磷脂的摩尔比为5～50：100～250：8000～12000。

活性氧(reactive oxidative species，ROS)/氧自由基导致的氧化应激会对精子造成损伤。本发明中采用白藜芦醇、还原型谷胱甘肽和卵磷脂用于制备体外受精培养液，可以提供稳定的受精环境，去除细胞产生的活性氧和精子在运动过程中产生的活性氧自由基，减少活性氧对精子和卵子的伤害，还能提高精子活力，修复细胞损伤，提高受精率和囊胚形成率。

白藜芦醇(Resveratrol，Res)，化学名为3,5,4′-三羟基1,2-二苯乙烯(3,5,4′-trihydroxystilbene)，是一种含有芪类结构的非黄酮类多酚化合物。本发明将白藜芦醇用在体外受精培养液中可以去除细胞产生的活性氧，减少活性氧对精子和卵子的伤害。

还原型谷胱甘肽能参与体内氧化还原过程，在外受精培养液中起去除精子在运动过程中产生的活性氧自由基的作用，进一步减小活性氧对精子和卵子的伤害。

体外受精培养液中卵磷脂的存在，能够提高精子活力，修复细胞损伤。

进一步，所述白藜芦醇、还原型谷胱甘肽和卵磷脂的摩尔比为10～40：150～250：9000～11000。

作为一种优选，所述白藜芦醇、还原型谷胱甘肽和卵磷脂的摩尔比为20～40：200～250：9000～11000。