[发明专利]DEFA1B基因在制备慢性阻塞性肺疾病的诊断工具中的用途有效
申请号: | 201810287900.7 | 申请日: | 2018-04-03 |
公开(公告)号: | CN108486243B | 公开(公告)日: | 2019-01-29 |
发明(设计)人: | 刘敏;任雁宏 | 申请(专利权)人: | 中日友好医院 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12N15/11 |
代理公司: | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 | 代理人: | 朱萍;孟祥斌 |
地址: | 100029 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 慢性阻塞性肺疾病 基因 高通量筛选 生物标志物 诊断 差异表达 患者血液 相关基因 早期诊断 诊断工具 大样本 含量比 无创 制备 验证 研究 | ||
1.检测DEFA1B基因表达的试剂在制备诊断慢性阻塞性肺疾病的试剂盒中的用途,其特征在于,所述诊断试剂盒包含SYBR Green聚合酶链式反应体系、用于扩增DEFA1B基因和管家基因的引物对;所述SYBR Green聚合酶链式反应体系包含PCR缓冲液、dNTPs、SYBR Green荧光染料。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述扩增DEFA1B基因的引物对的序列如下:正向序列5’-AAAGCATCCAGGCTCAAG-3’,反向序列5’- TTCCATAGCGACGTTCTC-3’;所述管家基因是GAPDH,扩增GAPDH基因的引物对的序列如下:正向序列5’-AACTCTGGTAAAGTGGATATTG-3’,反向序列5’-GGTGGAATCATATTGGAACA-3’。
3.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述PCR缓冲液包含:25 mM KCL、2.5 mMMgCL2、200 mM (NH4)2SO4。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的用途,其特征在于,所述诊断试剂盒还包含M-MLV逆转录体系和/或RNA提取试剂;所述逆转录体系包含:T重复寡核苷酸Oligo dT、逆转录反应液、M-MLV逆转录酶、RNA酶抑制剂、dNTPs;所述RNA提取试剂包含Trizol、氯仿、异丙醇、75%乙醇。
5.根据权利要求4所述的用途,其特征在于,所述逆转录反应液包含:250 mM pH 8.3Tris-HCL、375 mM KCL、15 mM MgCL2、50 mM DTT。
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