[发明专利]一种从猕猴桃果实中提取和鉴定多酚类物质的方法在审

专利信息
申请号: 201810288809.7 申请日: 2018-04-03
公开(公告)号: CN108680660A 公开(公告)日: 2018-10-19
发明(设计)人: 梁东;夏惠;赵雪雯;吕秀兰;林立金 申请(专利权)人: 四川农业大学
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/54;G01N30/74
代理公司: 成都帝鹏知识产权代理事务所(普通合伙) 51265 代理人: 黎照西
地址: 611130 四*** 国省代码: 四川;51
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摘要:
搜索关键词: 多酚类物质 猕猴桃多酚 猕猴桃果实 提取液 猕猴桃 多酚 高效液相色谱仪 定量分析 甲醇溶液 快速检测 植物多酚 准确度 检测 定性
【权利要求书】:

1.一种从猕猴桃果实中提取和鉴定多酚类物质的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

(1)猕猴桃多酚类物质的提取:

取猕猴桃果肉,经干燥研磨成猕猴桃粉,向其中加入提取液进行超声提取,所述提取液为70%甲醇溶液(V:V)内含2%蚁酸(V:V)的混合溶液,提取完毕后进行离心,取离心后的上清液用过滤膜过滤得到滤液;

(2)猕猴桃多酚类物质的定性和定量分析:

A.采用高效液相色谱仪测定滤液中各种多酚类物质的含量,色谱柱为:Comatex C18(250mm*4.6mm,5μm),流动相A为2%乙酸水溶液(V/V);流动相B为0.5%乙酸-乙腈水(乙酸:乙腈=1:1,V/V);检测器:DAD;柱温:30℃;进样量:20μL;流速:1mL/min;紫外检测波长:210nm;梯度洗脱程序如下:0-50min,流动相A的体积占比为90%-55%;50-60min,流动相A的体积占比为55%-0%;60-65min,流动相A的体积占比为0%-90%;分别在以下波长下进行检测:260nm、270nm、280nm、320nm、330nm、360nm,得到猕猴桃样品色谱图;

B.标准溶液的配制:取各多酚类物质标准品,分别用色谱甲醇溶解,配制成800mg/L的母液,再逐级稀释配成浓度为0.5、1、2、5、10、20、25、50、100mg/L的标准溶液,再配制成混合标准溶液,备用,取20μL标准溶液进样分析,得到标准品色谱图,再制作成标准曲线;

C.根据高效液相色谱仪检测出的猕猴桃样品色谱图与标准品色谱图进行对比鉴定,并通过标准曲线对提取到的多酚类物质进行定量分析。

2.根据权利要求1所述的从猕猴桃果实中提取和鉴定多酚类物质的方法,其特征在于,所述猕猴桃粉与提取液的料液比为2:3g/mL。

3.根据权利要求1所述的从猕猴桃果实中提取和鉴定多酚类物质的方法,其特征在于,所述超声提取的条件为:将样品在30℃的恒温下50/60Hz超声提取30min。

4.根据权利要求1所述的从猕猴桃果实中提取和鉴定多酚类物质的方法,其特征在于,所述离心的操作为:在10000g下离心10min。

5.根据权利要求1所述的从猕猴桃果实中提取和鉴定多酚类物质的方法,其特征在于,所述过滤膜的孔径大小为0.45μm。

6.根据权利要求1所述的从猕猴桃果实中提取和鉴定多酚类物质的方法,其特征在于,所述多酚类物质标准品包括:原儿茶酸、绿原酸、表儿茶素、咖啡酸、对香豆酸、槲皮苷、香草酸、阿魏酸、对羟基苯甲酸的标准品,所述标准品的样品纯度≥98%。

7.根据权利要求1所述的从猕猴桃果实中提取和鉴定多酚类物质的方法,其特征在于,所述猕猴桃粉是将猕猴桃果肉洗净、去皮、切片后经真空冷冻干燥研磨成粉。

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