[发明专利]一种抑制鸡SOX5基因表达的shRNA序列及其应用

权利要求书

1.一种抑制鸡SOX5基因表达的shRNA序列，其特征在于，包括正义链和反义链，正义链和反义链序列如下所示：

SOX1312-a正义链：

5’-CCGGCGGCAGATGAAGGAGCAACTTCTCGAGAAGTTGCTCCTTCATCTGCCGTTTTTG-3’，其为SEQID NO:1所示；

SOX1312-b反义链：

5’-AATTCAAAAACGGCAGATGAAGGAGCAACTTCTCGAGAAGTTGCTCCTTCATCTGCCG-3’，其为SEQID NO:2所示；

其中，CTCGAG为loop序列。

2.一种抑制鸡SOX5基因表达的shRNA序列，其特征在于，包括正义链和反义链，正义链和反义链序列如下所示：

SOX1635-a正义链：

5’-CCGGGAGGAAGATCCTTCAAGCCTTCTCGAGAAGGCTTGAAGGATCTTCCTCTTTTTG-3’，其为SEQID NO:3所示；

SOX1635-b反义链：

5’-AATTCAAAAAGAGGAAGATCCTTCAAGCCTTCTCGAGAAGGCTTGAAGGATCTTCCTC-3’，其为SEQID NO:4所示。

3.一种抑制鸡SOX5基因表达的shRNA序列，其特征在于，包括正义链和反义链，正义链和反义链序列如下所示：

SOX628-a正义链：

5’-CCGGCAGGAACAGATTGCAAGACAACTCGAGTTGTCTTGCAATCTGTTCCTGTTTTTG-3’，其为SEQID NO:5所示；

SOX628-b反义链：

5’-AATTCAAAAACAGGAACAGATTGCAAGACAACTCGAGTTGTCTTGCAATCTGTTCCTG-3’，其为SEQID NO:6所示。

4.一种慢病毒表达载体，其特征在于，所述慢病毒表达载体含有权利要求1-3任一项所述的抑制鸡SOX5基因表达的shRNA序列。

5.一种如权利要求4所述的慢病毒表达载体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)分别合成抑制鸡SOX5基因表达的shRNA序列的正义链和反义链；

(2)将正义链和反义链序列混合进行退火，以形成带有粘性末端的双链DNA；

(3)将慢病毒载体双酶切后，得到线性化的慢病毒载体；

(4)将步骤(2)中的双链DNA和步骤(3)中的线性化的慢病毒载体进行连接，转入大肠杆菌感受态细胞，涂布在含有抗生素的平板上，挑取平板上的单克隆进行测序验证，构建得到慢病毒表达载体。

6.根据权利要求5所述的慢病毒表达载体的构建方法，其特征在于，所述慢病毒载体为GV248载体。