[发明专利]L7D8单克隆抗体及其应用

说明书

本发明涉及基因工程技术领域，公开一种L7D8单克隆抗体，所述抗体包括重链和轻链，所述重链由氨基酸序列SEQ ID No.1构成，所述轻链由氨基酸序列SEQ ID No.2构成。L7D8单克隆抗体能够特异性结合XI型胶原蛋白。本发明的L7D8单克隆抗体可以结合天然的XI型胶原蛋白，能够通过免疫组织化学、ELISA和WB等方法，去检测生物样本中(组织切片、尿液、血液)的天然XI型胶原蛋白。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，具体地说是一种L7D8单克隆抗体及其应用。

背景技术

XI型胶原蛋白是关节软骨中的含量较少的蛋白，根据胶原软骨的成熟程度，其含量可介于3-10％。而II型胶原则是关节软骨中的主要成分，占总量的80-85％左右。XI型和II型胶原分子都是三螺旋结构。不同的是，XI型胶原蛋白是由三条不同的α链[α1(XI),α2(XI),α3(XI)]组成，而II型胶原是由三条相同的α链[α1(II)]组成的。其中α3(XI)与α1(II)是由同一个基因编码产生，具备相同的氨基酸序列，但α3(XI)具有更复杂的糖基化修饰。

胶原纤维网络赋予软骨组织锁住蛋白聚糖的能力，从而为组织提供拉伸张力，是正常软骨发育的必要条件。软骨特异性胶原纤维由XI型、II型和IX型胶原微纤维混合构成，正常的软骨中含有两种不同粗细的胶原纤维——细胶原纤维和粗胶原纤维，它们的直径分别为20nm和40nm。研究表明，XI型胶原蛋白纤维只存在细胶原纤维中，细胶原纤维具备“4+10”模式，即2个XI型和2个II型胶原微纤维组成纤维中心部分，再被10个II型胶原微纤维围绕成的环形所包绕。XI胶原微纤维不仅对胶原基质稳定性有很重要的贡献作用，还具有介导正常的细胶原纤维形成的作用。有研究表明，编码α1(XI)链的基因缺陷小鼠(Cho/Cho小鼠)，以及编码α1(II)、α1(XI)或α2(XI)链的基因缺陷人群(人Stickler/Marshall综合征)均无法形成正常的细胶原纤维，表现出软骨发育异常的现象。

目前只有CII、CI等胶原抗体(或产生针对CII/CI抗体的杂交瘤细胞)，如专利US9005912B2、EP 3050899A1、US 8394378B2，还未见有抗CXI的抗体公开。另外，XI型与II型胶原的结构和序列有一定的相似性，极有可能针对XI型胶原蛋白的抗体也会对II型胶原有一定的交叉反应，造成假阳性。现有技术中暂时还未发现有针对XI型胶原蛋白的单克隆抗体。因此，开发出一种能够特异性结合XI型胶原蛋白的L7D8单克隆抗体，是本领域技术人员亟需解决的技术问题。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种L7D8单克隆抗体及其应用。

本发明为实现上述目的，采取以下技术方案予以实现：

一种L7D8单克隆抗体，所述抗体包括重链和轻链，所述重链由氨基酸序列SEQ IDNo.1构成，所述轻链由氨基酸序列SEQ ID No.2构成。

其中，重链(IgG)的氨基酸序列SEQ ID NO.1如下所示：