[发明专利]重组哺乳动物细胞及目的物质的生产方法在审
申请号: | 201810295847.5 | 申请日: | 2018-03-30 |
公开(公告)号: | CN108690833A | 公开(公告)日: | 2018-10-23 |
发明(设计)人: | 山名良正;近藤雅子;上平正道 | 申请(专利权)人: | TOTO株式会社;国立大学法人九州大学 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12P21/00 |
代理公司: | 北京聿宏知识产权代理有限公司 11372 | 代理人: | 吴大建;霍玉娟 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 表达单元 细胞 蛋白质 哺乳动物细胞 重组哺乳动物 蛋白质生产 间隔序列 目的基因 生产重组 重组细胞 表达量 可显示 外源性 正相关 直线性 链长 整合 制造 生产 | ||
1.一种细胞,为整合多个包含外源性目的基因的表达单元而成的哺乳动物细胞,其特征在于,
所述多个表达单元的数量为3个以上,
在所述多个表达单元之间具备外源性的间隔序列,该间隔序列具有0.5kbp以上、20kbp以下的链长且所述间隔序列为相互不同的序列。
2.根据权利要求1所述的细胞,其特征在于,所述间隔序列的链长为1kbp以上、20kbp以下。
3.根据权利要求1所述的细胞,其特征在于,所述间隔序列的1个以上具有1kbp以上的链长。
4.根据权利要求1~3中任一项所述的细胞,其特征在于,整合多种所述目的基因而成。
5.根据权利要求1~4中任一项所述的细胞,其特征在于,将所述多个表达单元及间隔序列导入动物细胞内而成。
6.根据权利要求5所述的细胞,其特征在于,将所述多个表达单元及间隔序列导入动物细胞染色体而成。
7.根据权利要求5或6所述的细胞,其特征在于,所述动物细胞染色体的导入部位为稳定表达基因位点。
8.根据权利要求7所述的细胞,其特征在于,所述基因位点为次黄嘌呤-磷酸核糖基转移酶即hprt基因位点。
9.根据权利要求1~8中任一项所述的细胞,其特征在于,相邻间隔序列的同源性为55%以下或50%以下中的任一个。
10.根据权利要求1~8中任一项所述的细胞,其特征在于,相互不同的间隔序列的同源性为55%以下或50%以下中的任一个。
11.根据权利要求1~10中任一项所述的细胞,其特征在于,所述哺乳动物细胞为CHO细胞。
12.根据权利要求1~11中任一项所述的细胞,其特征在于,所述目的基因为编码蛋白质的基因。
13.根据权利要求12所述的细胞,其特征在于,所述蛋白质为抗体。
14.一种目的物质的生产方法,其特征在于,包括将权利要求1~13中任一项的细胞进行培养的工序。
15.一种方法,为权利要求1~13中任一项所述的细胞的制造方法,其特征在于,所述多个表达单元及间隔序列由AGIS导入。
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