[发明专利]一种小麦赤霉病菌规模化接种方法

权利要求书

1.一种小麦赤霉病菌规模化接种方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、小麦赤霉病菌分生孢子接种体的制备：挑选5～6个有代表性的强致病力菌株作为菌种，将这些菌株在PDA平板培养基上分别进行活化培养；采用打孔器从上述活化好的培养基中取4～6块菌饼，接种于的CMC液体培养基中，每个菌株接种10～12瓶；在恒温摇床上培养；使用新灭菌的四层纱布将液体培养物进行过滤，分别收集各菌株孢子悬浮液，等比例混配后，摇匀取样，在显微镜下用血球计数板将分生孢子浓度调整至1×10⁵个/mL～5×10⁵个/mL，作为接种体备用；若暂时不接种，将接种悬浮液放置于冰箱中冷藏保存，制备得到分生孢子接种体；

步骤2、孢子悬浮液电动喷雾接种：鉴定材料处于扬花初期时，选择傍晚或者阴天，将步骤1的分生孢子接种体，加入吐温20后，采用电动喷雾器，均匀喷雾于待接种鉴定的试验小区麦穗上；

步骤3、盖膜保湿：采用白色透明塑料薄膜，覆盖麦穗，保湿后撤去薄膜。

2.根据权利要求1所述的小麦赤霉病菌规模化接种方法，其特征在于，PDA平板培养基配方为：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂粉15g，蒸馏水定容至1L；配制方法：马铃薯洗净、去皮、切成小块，称取200g，加水煮沸20～30分钟直至完全煮烂熟，多层纱布过滤去渣，向滤液中补足水分至1L；按照一定体积分装后，依照比例加入葡萄糖和琼脂粉，摇晃混合均匀，121℃高温湿热灭菌20min，室温保存。

3.根据权利要求1所述的小麦赤霉病菌规模化接种方法，其特征在于，所述CMC液体培养基配方为：CMC 15g，KH₂PO₄ 1.0g，NH₄NO₃ 1.0g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，酵母膏1.0g，蒸馏水定容至1L；配制方法：将CMC缓慢加入80℃的热水中，待完全溶解后补足水分至1L；分装后，121℃高温湿热灭菌20min，室温保存。

4.根据权利要求1所述的小麦赤霉病菌规模化接种方法，其特征在于，恒温摇床中的温度为25℃，培养转速为175rpm，培养时间为5～7天。

5.根据权利要求1所述的小麦赤霉病菌规模化接种方法，其特征在于，冷藏温度为4℃，冷藏时间为5d～6d。

6.根据权利要求1所述的小麦赤霉病菌规模化接种方法，其特征在于，步骤2中的处于扬花初期是指扬花的麦穗数约占总穗数的10％；吐温20的添加量为分生孢子接种体体积的1/10000；加入吐温20后的分生孢子接种体的接种量为15L～18L/亩。

7.根据权利要求1所述的小麦赤霉病菌规模化接种方法，其特征在于，步骤3中的保湿时间为48h。