[发明专利]一种检测晚期糖基化终末产物的方法和应用

权利要求书

1.一种检测晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1)电化学免疫传感器的制备：首先在打磨并清洗过的玻碳电极表面滴涂石墨烯-壳聚糖，晾干后在其表面滴涂N(ε)羧甲基赖氨酸溶液，再晾干后即得到所述的电化学免疫传感器；

步骤2)标准溶液的配制：配制含有晚期糖基化终末产物的乙醇溶液作为标准溶液，将含有浓度为0的晚期糖基化终末产物的标准溶液作为空白标样；

步骤3)工作曲线的建立：将步骤1)制备的电化学免疫传感器浸入含有戊糖素单克隆抗体和步骤2)制备的标准溶液的磷酸缓冲溶液中恒温孵育，孵育后用磷酸缓冲溶液冲洗电化学免疫传感器，然后将其置于5mmol/L二茂铁的乙腈溶液中进行差分脉冲伏安扫描，以孵育前后响应电流变化值ΔI对标准溶液中晚期糖基化终末产物浓度的对数值logC作图，得ΔI-logC工作曲线，采用线性回归法获得ΔI-logC线性回归方程；

步骤4)晚期糖基化终末产物的测定：配置含有待测样品的乙醇溶液，按照与步骤3)相同的方法对所述电化学免疫传感器进行孵育和差分脉冲伏安扫描，记录响应电流变化值ΔI_x，将其代入ΔI-logC线性回归方程，即可得出待测样品中晚期糖基化终末产物的浓度。

2.根据权利要求1所述的一种检测晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，所述晚期糖基化终末产物为N(ε)羧甲基赖氨酸、N(ε)羧乙基赖氨酸、戊糖素、丙酮醛咪唑啉酮或精氨嘧啶。

3.根据权利要求1所述的一种检测晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，以步骤2)所述空白标样的测定值标准偏差的3倍作为样品检测限，重复步骤3)可得出晚期糖基化终末产物样品的检测限。

4.根据权利要求1所述的一种检测晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，步骤2)所述乙醇溶液中，乙醇与水的体积比为2:3。

5.权利要求1～4任一项所述的检测晚期糖基化终末产物的方法在AGEs临床检测上的应用。