[发明专利]一种免疫磁珠及其制备方法及应用有效
申请号: | 201810300413.X | 申请日: | 2018-04-04 |
公开(公告)号: | CN108508195B | 公开(公告)日: | 2021-04-30 |
发明(设计)人: | 丁轲;孙毅蒙;韩涛;陈湘宁 | 申请(专利权)人: | 北京农学院 |
主分类号: | G01N33/531 | 分类号: | G01N33/531;G01N33/543 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 王闯 |
地址: | 100000 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 免疫 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种免疫磁珠的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤A:将一磷酸腺苷或其金属盐、水相缓冲液、四氧化三铁、石蜡和司盘80混合,搅拌形成乳化体系;其中,所述石蜡和所述司盘80的体积比为7:93~100;所述一磷酸腺苷或其金属盐与所述四氧化三铁的质量比为0.1~0.3:0.2;
步骤B:向所述乳化体系中加入戊二醛,恒温下发生第一步交联反应;然后再加入抗体和锌盐,发生第二步交联反应,之后用磁铁分离出其中的固体物。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述水相缓冲液的pH值为7~8。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述水相缓冲液为4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述第一步交联反应的温度为:35~45℃;
所述第二步交联反应的温度为:20~30℃。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤B中,抗体和锌盐的加入方式为:先逐滴加入抗体,后逐滴加入锌盐。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤B中,所述形成乳化体系时的搅拌方式为机械搅拌,转速在300~1000 r/min。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤B中,所述抗体为玉米赤霉烯酮抗体。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤B中,所述抗体为玉米赤霉烯酮单抗。
9.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述一磷酸腺苷或其金属盐与锌盐中锌离子的摩尔比为1:1。
10.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,所述玉米赤霉烯酮抗体与所述一磷酸腺苷或其金属盐的质量比为0.2~0.3:19。
11.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤B中,戊二醛的加入方式为:加入体积浓度为20~30%的戊二醛溶液。
12.根据权利要求1或7所述的制备方法,其特征在于,所述步骤B中,抗体和锌盐的加入方式为:先以0.9~1.1 mg/min的速度滴加抗体,后以0.045~0.055 mmol/min Zn2+的速度滴加锌盐。
13.一种免疫磁珠,其特征在于,采用权利要求1-12任一项所述的制备方法制得。
14.权利要求13所述的免疫磁珠的应用,其特征在于,所述免疫磁珠用于分离、纯化或检测抗原。
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