[发明专利]一种间充质干细胞完全培养基组合物在审
申请号: | 201810306206.5 | 申请日: | 2018-04-08 |
公开(公告)号: | CN110343659A | 公开(公告)日: | 2019-10-18 |
发明(设计)人: | 仝彩玲 | 申请(专利权)人: | 生物角(厦门)科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人: | 张松亭;姜谧 |
地址: | 361000 福建省厦门市中国(福建)自由贸*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 间充质干细胞 充质干细胞 完全培养基 培养基 种间 配制 多向分化 胎牛血清 巯基乙醇 溶剂 抗生素 | ||
本发明公开了一种间充质干细胞完全培养基组合物,以DMEM培养基为溶剂,并含有如下浓度的组分:胎牛血清2~15wt%、β‑巯基乙醇20~100nM/L、FGF 5~50ng/mL、EGF5~50ng/mL、1×的NEAA和1×的抗生素。本发明的培养基主要基于间充质干细胞对营养物主的需要配制,可以维持间充质干细胞的形态,并保持间充质干细胞的多向分化性,此外本发明的培养基的配制方法简单,成本低廉。
技术领域
本发明属于细胞培养技术领域,具体涉及一种间充质干细胞完全培养基组合物。
背景技术
间充质干细胞培养基是开展间充质干细胞治疗试验的基础,间充质细胞状态的好坏,直接关系到研究的结果,状态良好的间充质干细胞是干细胞修复功能的基础。间充质干细胞具有多向分化性,在一定条件下可以分化为成脂细胞、成骨细胞和成软骨细胞。不良的培养条件可导致干细胞分化为其他细胞,同时也可造成间充质干细胞的老化,从而失去其修复功能。随着干细胞的发展,干细胞应用于治疗心脏疾病的研究也越来越多,干细胞用于组织修复的研究成为再生医学的热点,以间充质修复心肌梗死、肾衰治疗、神经修复等研究为主。然而,在干细胞培养过程中往往会出现结果不一致,无法重复现象。这种现象和细胞培养有着密切关系,不同状态的干细胞其活性和修复作用也不同,所以选择培养基成为间充质干细胞修复研究的重要部分,直接关系到细胞的盛装状态。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术缺陷,提供一种间充质干细胞完全培养基组合物。
本发明的技术方案如下:
一种间充质干细胞完全培养基组合物,以DMEM培养基为溶剂,并含有如下浓度的组分:胎牛血清2~15wt%、β-巯基乙醇20~100nM/L、FGF 5~50ng/mL、EGF 5~50ng/mL、1×的NEAA和1×的抗生素;
上述间充质干细胞完全培养基组合物的配制方法为:将胎牛血清、β-巯基乙醇、FGF、EGF、1×的NEAA和1×的抗生素溶解于DEME培养基中,过滤除菌后即成。
在本发明的一个优选实施方案中,以DMEM培养基为溶剂,并含有如下浓度的组分:胎牛血清8~12wt%、β-巯基乙醇40~60nM/L、FGF 5~15ng/mL、EGF 5~15ng/mL、1×的NEAA和1×的抗生素。
进一步优选的,以DMEM培养基为溶剂,并含有如下浓度的组分:胎牛血清10wt%、β-巯基乙醇50nM/L、FGF 10ng/mL、EGF 10ng/mL、1×的NEAA和1×的抗生素。
在本发明的一个优选实施方案中,所述抗生素为antibiotic-antimycotic。
本发明的有益效果是:
1、本发明的培养基主要基于间充质干细胞对营养物主的需要配制,可以维持间充质干细胞的形态,并保持间充质干细胞的多向分化性,此外本发明的培养基的配制方法简单,成本低廉。
2、本发明的配制方法简单,成本低廉。
附图说明
图1为本发明实施例1中的人脐带间充质干细胞的培养照片。
图2为本发明实施例2中大鼠间充质干细胞的培养照片,其中,A:大鼠MSC形态学观察;B:大鼠MSC向成软骨细胞分化;C:大鼠MSC向成骨细胞分化;D:大鼠MSC向脂肪细胞分化。
图3为本发明实施例3中的小鼠间充质干细胞的培养照片。
图4为本发明实施例2中的大鼠间充质干细胞流式图。
具体实施方式
以下通过具体实施方式结合附图对本发明的技术方案进行进一步的说明和描述。
实施例1
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