[发明专利]一种间充质干细胞无血清培养基组合物在审
申请号: | 201810308516.0 | 申请日: | 2018-04-08 |
公开(公告)号: | CN110343660A | 公开(公告)日: | 2019-10-18 |
发明(设计)人: | 仝彩玲 | 申请(专利权)人: | 生物角(厦门)科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人: | 张松亭;姜谧 |
地址: | 361000 福建省厦门市中国(福建)自由贸*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 间充质干细胞 无血清培养基 充质干细胞 种间 病原微生物 地塞米松 多向分化 亚硒酸钠 营养物质 转铁蛋白 巯基乙醇 维生素C 胰岛素 过敏原 乙醇胺 溶剂 氢化 抗生素 配制 | ||
本发明公开了一种间充质干细胞无血清培养基组合物,其pH为7.2~7.4,以DMEM培养基为溶剂,并含有如下浓度的组分:地塞米松1~100nM/L、氢化可的松0.1~10ug/mL、乙醇胺0.2~2ug/mL、FGF 5~50ng/mL、EGF 5~50ng/mL、亚硒酸钠0.01~0.1ug/mL、胰岛素0.5~1ug/mL、β‑巯基乙醇10~50nM、转铁蛋白0.5~5ug/mL、维生素C 0.5~10ug/mL、1×的L‑Glu、1×的NEAA和1×的抗生素。本发明成分明确,无病原微生物,无过敏原,主要基于间充质干细胞对营养物质的需要配制,可以维持间充质干细胞的形态,并保持间充质干细胞的多向分化功能8代以上。
技术领域
本发明属于细胞培养技术领域,具体涉及一种间充质干细胞无血清培养基组合物。
背景技术
间充质干细胞是临床上细胞治疗最常用的细胞,其可以修复组织损伤,治疗心脏梗死、肾衰等疾病,也是美容个的细胞。含血清培养基培养间充质干细胞,增殖快,细胞状态好,营养充足,但血清中含有一些异源蛋白,可以导致输注干细胞的病人出现过敏反应,血清中含有一些课导致人蓄共患病的病毒及经外泌体传播的病毒,可导致输注干细胞的病人罹患人蓄共患病,因此含血清培养基给细胞治疗带来了潜在危害。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术缺陷,提供一种间充质干细胞无血清培养基组合物。
本发明的技术方案如下:
一种间充质干细胞无血清培养基组合物,其pH为7.2~7.4,以DMEM培养基为溶剂,并含有如下浓度的组分:地塞米松1~100nM/L、氢化可的松0.1~10ug/mL、乙醇胺0.2~2ug/mL、FGF 5~50ng/mL、EGF 5~50ng/mL、亚硒酸钠0.01~0.1ug/mL、胰岛素0.5~1ug/mL、β-巯基乙醇10~50nM、转铁蛋白0.5~5ug/mL、维生素C 0.5~10ug/mL、1×的L-Glu、1×的NEAA和1×的抗生素;
上述间充质干细胞无血清培养基组合物的配制方法为:将地塞米松、氢化可的松、乙醇胺、FGF、EGF、亚硒酸钠、胰岛素、β-巯基乙醇、胰岛素、转铁蛋白、维生素C、L-Glu、NEAA、抗生素溶解于DEME培养基中,调节pH值使其在7.2~7.4之间,过滤除菌后即成。
在本发明的一个优选实施方案中,以DMEM培养基为溶剂,并含有如下浓度的组分:地塞米松5~20nM/L、氢化可的松8~10ug/mL、乙醇胺0.2~1ug/mL、FGF 10~20ng/mL、EGF10~20ng/mL、亚硒酸钠0.03~0.07ug/mL、胰岛素0.5~0.8ug/mL、β-巯基乙醇40~50nM、转铁蛋白2~3ug/mL、维生素C 2~3ug/mL、1×的L-Glu、1×的NEAA和1×的抗生素。
进一步优选的,所述间充质干细胞无血清培养基以DMEM培养基为溶剂,并含有如下浓度的组分:地塞米松10nM/L、氢化可的松、10ug/mL、乙醇胺0.2ug/mL、FGF 10ng/mL、EGF10ng/mL、亚硒酸钠0.05ug/mL、胰岛素0.5ug/mL、β-巯基乙醇50nM、转铁蛋白2.5ug/mL、维生素C 2.5ug/mL、1×的L-Glu、1×的NEAA和1×的抗生素。
在本发明的一个优选实施方案中,所述抗生素为antibiotic-antimycotic。
在本发明的一个优选实施方案中,用固体碳酸氢钠或hepes调节pH。
本发明的有益效果是:
1、本发明成分明确,无病原微生物,无过敏原,主要基于间充质干细胞对营养物质的需要配制,可以维持间充质干细胞的形态,并保持间充质干细胞的多向分化功能8代以上。
2、本发明的配制方法简单,成本低廉。
附图说明
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