[发明专利]南蛇藤中雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙含量的检测方法

说明书

本发明公开了一种南蛇藤中雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙含量的检测方法，包括：（1）雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙对照品溶液的制备；（2）供试品溶液的制备：南蛇藤药材粉碎（过四号筛），取1.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙腈25 mL，称定重量，超声处理（功率300 W，频率40 kHz）30 min，用乙腈补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；（3）色谱条件：流动相为乙腈：0.1%磷酸水=80：20；检测波长为203nm；流速：1.0 mL·min^‑1；检测器：紫外；柱温：30℃；进样量：10µL。该方法简单，专属性强，重现性好，能够对南蛇藤药材的品质进行有效评价。

技术领域

本发明属于中药材质量控制技术领域，具体涉及南蛇藤中雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙含量的检测方法。

背景技术

南蛇藤(Celastrus orbiculatus Thunb.)是卫矛科南蛇藤属植物，又名过山风，全国大部分地区均有分布。中医认为南蛇藤具有清热、祛风、除湿、活血解毒消肿的功效，常用于治疗风湿性关节炎、腰腿痛、筋骨痛、牙痛、闭经、痢疾、跌打损伤、肠风痔漏、毒蛇咬伤、疮疡、痈疖等症；此外，现代药理研究表明，南蛇藤提取物还具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗病毒等作用。

南蛇藤中含有较高的雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙活性成分，文献报道雷公藤内酯可诱导肿瘤细胞的凋亡，是抗肿瘤活性的有效成分，因此，有必要对南蛇藤中雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙的含量进行检测。目前，采用高效液相色谱法测定南蛇藤药材中的有效成分含量尚未见报道。本发明采用高效液相色谱法测定了南蛇藤药材中有效成分雷公藤内酯甲和雷公藤内酯乙的含量，是一种快速、高效、可行的检测方法，为南蛇藤的质量评价提供依据。

发明内容

本发明的目的在于提供一种南蛇藤中雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙含量的检测方法，以解决现有南蛇藤药材质量无法保证的技术难题。

为实现上述目的，本发明是采用如下技术方案实现的：

一种南蛇藤中雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙含量的检测方法，所述方法采用高效液相色谱法测定雷公藤内酯甲、雷公藤内酯乙的含量，具体操作步骤如下：

(1)雷公藤内酯甲对照品溶液的制备：精密称取雷公藤内酯甲对照品适量，用乙腈溶解并稀释成含雷公藤内酯甲50μg·mL^-1的对照品溶液；

(2)雷公藤内酯乙对照品溶液的制备：精密称取雷公藤内酯乙对照品适量，用乙腈溶解并稀释成含雷公藤内酯乙50μg·mL^-1的对照品溶液；

(3)供试品溶液的制备：南蛇藤药材粉碎(过四号筛)，取1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙腈25mL，称定重量，超声处理(功率300W，频率40kHz)30min，用乙腈补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

或取南蛇藤药材粉末2.002g，置索氏提取器中，加甲醇50ml，加热回流3小时，放冷，采用50ml甲醇荡洗索氏提取器，合并甲醇提取液，提取液采用旋转蒸发仪旋转至近干，加入2.0g硅藻土拌样，溶剂挥干，加入氯仿超声20min提取3次，每次30ml，滤过，合并提取液，旋转蒸发仪旋转蒸干，残渣采用乙腈：0.1％磷酸水溶液＝80：20溶解并定容至25mL容量瓶中，摇匀，滤过，得供试品溶液；

(4)高效液相色谱法测定：

色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈：0.1％磷酸水＝80：20；检测波长为203nm；流速：1.0mL·min^-1；检测器：紫外；柱温：30℃；进样量：10μL；

测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱，测定，记录40min的色谱图，即得。