[发明专利]一种高细胞毒性的CIK细胞制剂及其培养方法在审
| 申请号： | 201810315320.4 | 申请日： | 2018-04-10 |
| 公开（公告）号： | CN108410822A | 公开（公告）日： | 2018-08-17 |
| 发明（设计）人： | 王立平;王炜玮;曲迅;李家敏;王方聚;张明徽;刘君;周武松;田明一;吕春明;隋丽;战美娜;韩佳佳;宁应梅 | 申请（专利权）人： | 龙口南山养生谷肿瘤医院 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 李进 |
| 地址： | 265700 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞毒性 细胞培养 外周血单个核细胞 淋巴细胞分离液 淋巴细胞培养基 体外扩增培养 单个核细胞 抗肿瘤效应 离心收集 细胞活性 肿瘤治疗 自体血浆 培养瓶 外周血 血浆层 回输 抗凝 移除 免疫力 细胞 | ||
1.一种高细胞毒性的CIK细胞的培养方法，其特征在于，其包括：
将抗凝外周血离心，移除血浆层后与淋巴细胞分离液混合，分离出外周血单个核细胞；
用淋巴细胞培养基调整所述外周血单个核细胞的细胞浓度，并加入IL-2、IFN-γ和自体血浆，置于培养瓶中进行培养；以及
体外扩增培养，离心收集得到的CIK细胞。
2.根据权利要求1所述的高细胞毒性的CIK细胞的培养方法，其特征在于，所述培养瓶中，所述IL-2的终浓度为800～1200IU/mL，所述IFN-γ的终浓度为800～1200IU/mL。
3.根据权利要求1所述的高细胞毒性的CIK细胞的培养方法，其特征在于，所述淋巴细胞培养基为GT-T551H3培养基。
4.根据权利要求1所述的高细胞毒性的CIK细胞的培养方法，其特征在于，所述自体血浆的制备方法包括：将所述血浆层于50～60℃下放置25～35min后，再于0～10℃下静置10～20min后，离心取上清。
5.根据权利要求1所述的高细胞毒性的CIK细胞的培养方法，其特征在于，所述培养瓶中，所述自体血浆的终浓度为0.5～1.5％。
6.根据权利要求1所述的高细胞毒性的CIK细胞的培养方法，其特征在于，所述外周血单个核细胞的细胞浓度为0.5×105～0.5×107个/mL。
7.根据权利要求1所述的高细胞毒性的CIK细胞的培养方法，其特征在于，所述培养瓶在CO2培养箱中培养。
8.根据权利要求1所述的高细胞毒性的CIK细胞的培养方法，其特征在于，所述培养瓶的培养温度为35～40℃。
9.一种根据权利要求1～8任一项所述的培养方法制得的CIK细胞制剂。
10.根据权利要求9所述的CIK细胞制剂，其特征在于，还包括人血清白蛋白、生理盐水。
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