[发明专利]一种人白介素2和抗人上皮细胞黏附分子单链抗体融合蛋白及其应用

权利要求书

1.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白由白介素2(IL-2)与抗人上皮细胞黏附分子(EpCAM)单链抗体融合连接构成EPIL2。

2.根据权利要求1所述融合蛋白，其特征在于，所述白介素2(IL-2)可选自野生型IL-2或基因工程化的IL-2，优选基因工程化的IL-2；所述野生型IL-2的氨基酸序列如SEQ IDNo.2所示；所述基因工程化的IL-2具有至少3处氨基酸残基取代；参照野生型IL-2的氨基酸序列，所述氨基酸残基取代优选C125S、V69A、I128T、和/或Q74P；更优选的，所述基因工程化的IL-2的氨基酸序列如SEQ ID No.4、6、或8所示。

3.根据权利要求1所述融合蛋白，其特征在于，所述抗人上皮细胞黏附分子(EpCAM)单链抗体的氨基酸序列如SEQ ID No.11或13所示。

4.根据权利要求1-3任一项所述融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.15或17所示。

5.编码权利要求1-4任一项所述融合蛋白的分离的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子优选SEQ ID NO.16或18所示核苷酸序列。

6.一种载体，其特征在于，所述载体包含权利要求5所述核酸分子。

7.一种细胞，其特征在于，所述细胞包含权利要求1-4任一项所述融合蛋白EPIL2或编码融合蛋白的核酸分子，用于生产融合蛋白；所述细胞选自非人哺乳动物细胞，优选HEK293和CHO细胞。

8.权利要求1-4任一项所述融合蛋白和/或权利要求5所述核酸分子在制备药物组合物或体外诊断试剂盒中的应用，所述药物组合物优选为治疗肿瘤的药物组合物；所述体外诊断试剂盒优选为用于肿瘤免疫药物的药效预测和评价的试剂盒；所述肿瘤优选为结肠癌。

9.一种药物制剂、药物组合物或试剂盒，其特征在于，所述药物制剂、药物组合物或试剂盒包含权利要求1-4任一项所述融合蛋白EPIL2。

10.权利要求1-4任一项所述融合蛋白EPIL2与其他治疗肿瘤的药物共同用于制备治疗肿瘤的药物组合物或试剂盒的用途，所述其他治疗肿瘤的药物优选抗PD-1/PD-L1抗体。

11.权利要求1-4任一项所述融合蛋白EPIL2在激活T细胞扩增中的用途。

12.权利要求1-4任一项所述融合蛋白EPIL2在评价抗PD-1/PD-L1抗体药物作用/疗效中的用途。

13.一种基因工程化的IL-2，其特征在于，所述基因工程化的IL-2具有至少3处氨基酸残基取代；参照野生型IL-2的氨基酸序列SEQ ID No.2，所述氨基酸残基取代优选C125S、V69A、I128T、和/或Q74P；更优选的，所述基因工程化的IL-2的氨基酸序列如SEQ ID No.6或8所示。

14.编码权利要求13所述基因工程化的IL-2的分离的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子优选SEQ ID NO.5或7所示核苷酸序列。