[发明专利]一种用于治疗勃起功能障碍的含细胞外囊泡的可注射水凝胶及其制备方法

说明书

本发明提供了一种用于治疗勃起功能障碍的含细胞外囊泡的可注射水凝胶，包括可注射水凝胶和离体的人间充质干细胞来源细胞外囊泡，所述的离体的人间充质干细胞来源细胞外囊泡的密度为5×10¹⁰个颗粒/毫升。本发明还提供了上述一种用于治疗勃起功能障碍的含细胞外囊泡的可注射水凝胶的制备方法。人间充质干细胞来源细胞外囊泡能够运载生长因子、核酸等生物活性物质促进血管修复和神经再生，从而恢复勃起功能。本发明通过阴茎海绵体注射人间充质干细胞来源细胞外囊泡解决难治性勃起功能障碍患者阴茎血管内皮和神经损伤的技术问题。本发明利用可注射水凝胶包裹人间充质干细胞来源细胞外囊泡为治疗勃起功能障碍提供安全、有效、使用方便的治疗药物制剂。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种用于治疗勃起功能障碍的药物，具体来说是一种用于治疗勃起功能障碍的含细胞外囊泡的可注射水凝胶及其制备方法。。

背景技术

目前勃起功能障碍的一线治疗手段是口服磷酸二酯酶-5抑制剂，例如他达拉非、西地那非等。该类型药物主要结构为非选择性或者选择性磷酸二酯酶-5抑制剂，治疗勃起功能障碍的原理为通过抑制阴茎磷酸二酯酶-5活性，通过减少降解来增加环磷酸鸟苷浓度。细胞外囊泡（extracellular vesicles）是细胞在增殖过程中释放入细胞外空间的囊状结构。根据直径大小，可以分为：外泌体（exosome，直径：50-100 nm）及微颗粒（microparticle，直径：100-1000 nm）。细胞外囊泡作为载体，运载着包括信号蛋白、脂质、核酸等成分，能够被远处的目标细胞所摄取内吞，从而能改变靶细胞的生物学行为。

目前勃起功能障碍的临床一线治疗药物磷酸二酯酶5抑制剂发挥作用依赖于完整的血管内皮，不能逆转血管内皮和神经损伤。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于治疗勃起功能障碍的含细胞外囊泡的可注射水凝胶及其制备方法，所述的这种用于治疗勃起功能障碍的含细胞外囊泡的可注射水凝胶及其制备方法要解决现有技术中用于治疗勃起功能障碍的药物副作用大，效果不佳的技术问题。

本发明提供了一种用于治疗勃起功能障碍的含细胞外囊泡的可注射水凝胶，包括可注射水凝胶和离体的人间充质干细胞来源细胞外囊泡，所述的离体的人间充质干细胞来源细胞外囊泡在可注射水凝胶中的密度为5×10¹⁰个颗粒/毫升。

进一步的，所述的含细胞外囊泡的可注射水凝胶中的溶剂为磷酸盐缓冲液，在所述的磷酸盐缓冲液中，含有磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠和氯化钾，所述的磷酸二氢钾的浓度为0.27g/L，所述的磷酸氢二钠的浓度为1.42g/L，所述的氯化钠的浓度为8g/L，所述的氯化钾的浓度为0.2g/L；所述的含细胞外囊泡的可注射水凝胶中的溶质由对羧基苯甲醛修饰的聚乙二醇和羟乙基壳聚糖组成，在所述的含细胞外囊泡的可注射水凝胶中，所述的对羧基苯甲醛修饰的聚乙二醇的质量百分比浓度为5%-20%，对羧基苯甲醛修饰的聚乙二醇的数均分子量为200-20000，所述的羟乙基壳聚糖的质量百分比浓度为1%-5%。

进一步的，所述的含细胞外囊泡的可注射水凝胶包括但不局限于对羧基苯甲醛修饰的聚乙二醇-羟乙基壳聚糖、氧化海藻酸-明胶、海藻酸、透明质酸、壳聚糖、或者丝素蛋白等天然高分子。

本发明还提供了上述的一种用于治疗勃起功能障碍的含细胞外囊泡的可注射水凝胶的制备方法，包括如下步骤：

1)一个提取人间充质干细胞来源细胞外囊泡的步骤：从离体的病人自体组织或者细胞库获得P4代脂肪来源间充质干细胞，在临床级人间充质干细胞无血清培养基中培养，当细胞融合达到80-90%时，加入无血清DMEM培养基，20~48 h后收集细胞上清液，细胞上清液经过300 g在4℃环境下离心10 min，16500 g在4℃环境下离心10 min去除细胞和细胞碎片，120000 g在4℃环境下离心70 min收集细胞外囊泡；