[发明专利]检测生物标志物表达水平的用品在指示癌变状态中的应用

说明书

本发明属于医疗卫生领域,具体涉及一种检测生物标志物表达水平的用品在指示癌变状态中的应用；所述生物标志物为LBP、编码LBP的基因、或者合成LBP的多肽或多肽片段；本发明首次提出非小细胞肺癌患者血清中外泌体蛋白LBP水平明显高于健康对照组；转移性非小细胞肺癌患者外泌体蛋白LBP明显高于非转移性非小细胞肺癌患者；因此血清中外泌体蛋白LBP的水平可以清楚的区别非小细胞肺癌患者与对照病例，可以区别转移性和非转移性非小细胞肺癌，以及肺腺癌及肺鳞癌。

技术领域

本发明属于医疗卫生领域,具体涉及一种检测生物标志物表达水平的用品在指示癌变状态中的应用。

背景技术

非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer, NSCLC）占所有肺癌的80%，约75%的患者在就诊时已出现远处转移，5年生存率仅2％。因此，现在迫切的需要一种较为灵敏的诊断标记物，为发生远处转移的NSCLC的早期诊断、早期治疗及预后判断提供客观依据。

肿瘤细胞来源的外泌体（Tomor-derived exosomes, TDEs）已经被证明可以促进癌症进展，由外泌体介导的细胞间相互作用可能在肿瘤的发生和远处转移中具有重要的作用。外泌体的分离及其在临床中的使用可替代侵入性手术以诊断或主要在NSCLC中的癌症患者的后续，其中在大多数患者中原发性肿瘤组织的可用性是困难的。此外，外泌体内容物如miRNAs，蛋白质等在外泌体膜的保护下免受酶的降解，TDEs易于在血液样本中获得。因此可以在循环血液中被稳定检测到，使其成为转移性NSCLC诊断的理想生物标志物。

随着对外泌体研究的不断深入，它在肿瘤转移机制中的作用也逐渐凸显。最近，肿瘤来源的外泌体（Tumor-derived exosomes，TDEs）已经被证明可以促进肿瘤的侵袭和转移。研究人员提出TDEs在肿瘤微环境内释放自分泌和旁分泌信号，以激活肿瘤上皮细胞的上皮-间充质间的转化。另外，转移性肿瘤中外泌体的产生速度和总量也较未发生转移的肿瘤外泌体高。有证据表明，外泌体可能会影响不同靶器官的转移效率，源于外泌体对特定受体细胞具有较强的亲和力。TDEs含有很多肿瘤相关蛋白，如表皮生长因子受体（EGFR），KRAS和RAB家族蛋白等。

TDEs中含有蛋白质、脂类和核酸等成分。它可以参与细胞间的信息交换，从而调节肿瘤的生成、血管生成、侵袭和转移。

2007年Valadi等首次鉴定出外泌体中含有遗传物质mRNAs及微小RNAs（miRNAs），被靶细胞摄取后这些遗传物质可发挥正常的生物学活性。外泌体中双链DNA的发现，使学者对这一领域有了新的认识。研究发现，肿瘤细胞分泌的外泌体（tumor-derived exosomes,TDEs）内双链DNA的遗传信息在一定程度上与肿瘤DNA相似，因此，如果存在于外泌体内的基因是稳定的，那么外泌体基因检测也许能成为一种用来检测突变和监测肿瘤发生发展的新方法。除蛋白质和核酸外，外泌体中也包含其来源细胞或者组织的脂质成分，现已证实其主要成分为胆固醇、甘油二酯、磷脂和甘油酰磷脂等，对于提高胞膜稳定性具有重要作用。此外，脂质体还具有生物活性，但是研究人员对其生理作用的研究仍不充分。

外泌体内的蛋白质主要包含其来源细胞的特异性蛋白，如APCs分泌的外泌体可表达MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ类分子、共刺激蛋白CD80等、四次跨膜蛋白（如CD9、CD63、CD81和CD82等）和内体运输分拣复合物（endosomal sorting complex required fortransport，ESCRT）；另外外泌体中还包含参与细胞间物质交换的蛋白，如Rab蛋白家族（如Rab27、Rab11和Rab35）和热休克蛋白（如Hsp60、Hsp70和Hsp90等），细胞特异性蛋白能够识别不同细胞来源的外泌体。