[发明专利]一种应用免疫荧光干式定量法的肝素结合蛋白测定试剂盒及测定方法

权利要求书

1.一种应用免疫荧光干式定量法的肝素结合蛋白测定试剂盒，其特征在于，所述应用免疫荧光干式定量法的肝素结合蛋白测定试剂盒包括：检测反应板和检测缓冲液；

所述检测反应板包括：检测试纸条、滤血垫和吸水纸；

所述检测试纸条包括：包被有肝素结合蛋白单克隆抗体的硝酸纤维素膜和载膜底板；

所述检测缓冲液包括：荧光标记的肝素结合蛋白单克隆抗体的溶液。

2.根据权利要求1所述的应用免疫荧光干式定量法的肝素结合蛋白测定试剂盒，其特征在于，所述检测试纸的硝酸纤维素膜上还包被有羊抗兔单克隆抗体；所述检测缓冲液中还包括荧光标记的兔单克隆抗体。

3.根据权利要求1所述的应用免疫荧光干式定量法的肝素结合蛋白测定试剂盒，其特征在于，所述检测缓冲液的pH为7.2。

4.根据权利要求1所述的应用免疫荧光干式定量法的肝素结合蛋白测定试剂盒，其特征在于，所述检测缓冲溶液还包括：NaCl、Na₂HPO₄、KH₂PO₄、PVP、BSA、吐温-20、叠氮钠、proclin300。

5. 根据权利要求4所述的应用免疫荧光干式定量法的肝素结合蛋白测定试剂盒，其特征在于，所述检测缓冲溶液包括：8.00~60.00g/L NaCl、0.1~5.5 g/L Na₂HPO4、0.1~5.5 g/L KH₂PO4、0.5~5% PVP、0.5~5% BSA、0.05~1.0% 吐温-20、0.01~1.0% 叠氮钠、0.05~1.0%proclin300的溶液。

6.一种应用免疫荧光干式定量法的肝素结合蛋白的测定方法，其特征在于，所述应用免疫荧光干式定量法的肝素结合蛋白的测定方法应用权利要求1-5中任意一项所述的肝素结合蛋白测定试剂盒。

7.根据权利要求6所述的应用免疫荧光干式定量法的肝素结合蛋白的测定方法，其特征在于，将待测样本与检测缓冲溶液混合均匀，检测缓冲溶液中的荧光标记的肝素结合蛋白单克隆抗体与待测样本中的肝素结合蛋白抗原相结合，将混合后的检测缓冲溶液加至检测反应板的加样孔后，荧光标记的肝素结合蛋白单克隆抗体与肝素结合蛋白抗原的结合物在检测试纸条的检测区被包被有肝素结合蛋白单克隆抗体的硝酸纤维素膜捕获，形成肝素结合蛋白单克隆抗体-肝素结合蛋白抗原-荧光标记的肝素结合蛋白单克隆抗体的复合物，复合物的荧光抗体信号与肝素结合蛋白的浓度成正比，最后由免疫分析仪汇总分析计算得到样本中肝素结合蛋白抗原的浓度。

8.根据权利要求7所述的应用免疫荧光干式定量法的肝素结合蛋白的测定方法，其特征在于，在检测试纸的硝酸纤维素膜上包被有羊抗兔单克隆抗体，在检测缓冲液中添加荧光标记的兔单克隆抗体，检测缓冲溶液中的荧光标记的兔单克隆抗体被检测试纸上包被有羊抗兔单克隆抗体的硝酸纤维素膜捕获，形成羊抗兔单克隆抗体-荧光标记的兔单克隆抗体的复合物，该复合物的荧光标记信号作为试剂盒的内控指标，用于判断是否有足够的样本，层析过程是否正常。

9. 根据权利要求6所述的应用免疫荧光干式定量法的肝素结合蛋白的测定方法，其特征在于，所述肝素结合蛋白的测定方法的优选参数为：样本S为50 μl、检测缓冲液R为150 μl，检测缓冲液R+样本S的孵育时间为18 min，反应方法为免疫荧光法，反应温度为20~37℃，激发波长/接收波长为635 nm/680 nm。