[发明专利]一种超高效合相色谱-串联质谱技术拆分、测定手性农药异丙甲草胺对映体的方法

说明书

本发明属于分析化学领域和农药残留检测技术领域，具体是一种超高效合相色谱‑串联质谱技术拆分、测定手性农药异丙甲草胺对映体的方法。该方法采用QuEChERS方法提取烟草及谷物、干果中的异丙甲草胺，用合相色谱手性固定相结合三重四极杆串联质谱检测了异丙甲草胺手性农药的对映体，方法检出限为0.0012mg/kg本发明首次采用合相色谱快速的对异丙甲草胺进行手性分离，以超临界CO₂为流动相，节省了大量有机溶剂的使用，绿色环保。本发明方法使用合相色谱快速分析，有利于同分异构体的分离分析速度快，耗时仅仅4分钟，灵敏度高。

技术领域

本发明属于分析化学领域和农药残留检测技术领域，涉及手性农药的对映体的拆分及定量方法，具体是一种超高效合相色谱-串联质谱技术拆分、测定手性农药异丙甲草胺对映体的方法。

背景技术

目前使用的农药中有25％是手性的，手性农药的生物活性存在对映体差异性，其活性往往只存在于一个或少数几个对映体中，而手性农药的对映体在环境中的消解和归趋往往也有明显的不同。即手性农药对映体在自然环境和生物体中的活性、毒性以及吸收、代谢、降解等诸多方面可能存在巨大大差异。

异丙甲草胺是一种酰胺类杂草防除剂，因其具有广谱、高效、选择性强等特点，可广泛应用于70多种作物田的杂草防除剂。异丙甲草胺因含有两个手性中心：手性N 轴和手性碳，因此有4种光学异构体，分别为aS’1S-、aR’1S-、aR’1R-和aS’1R-。目前市场上常见的异丙甲草胺商品化产品有2种：一种是外消旋异丙甲草胺，即4种异构体同时存在，又称都尔、杜尔、杜耳、甲氧毒草胺；另一种是富S-异丙甲草胺，又称精异丙甲草胺，去除了2个非活性的R-（aR’1R-和aS’1R-）并富集了S-构型异构体（aS’1S-和aR’1S-）【分析化学研究简报，2004，32(2), 191-194】。异丙甲草胺的结构式如下所示：

目前，有采用液相色谱手性固定相分离异丙甲草胺异构体的报道[ 分析化学研究简报，2004，32(2), 191-194；农药，2008，47（9），655-656]，这些均是采用高效液相色谱-手性色谱柱进行分离，分离时间长，且未见为实施产品质量控制建立的定量分析方法。异丙甲草胺95％的除草活性来自富含手性碳为S-构型的异构体，因而建立异丙甲草胺对映体纯度的测定方法对于开发生产富S-异丙甲草胺产品和生产厂家进行产品质量控制是十分必要的。

发明内容

本发明的目的是提供一种采用合相色谱-串联质谱技术分离外消旋的异丙甲草胺的方法，该方法能快速、准确的将异丙甲草胺的一组对映体进行分离，并且可以准确定量，基质干扰少，环境友好。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种超高效合相色谱-串联质谱技术拆分、测定手性农药异丙甲草胺对映体的方法，包括以下步骤：

(1)样品前处理, 所述样品为烟草、谷物或干果。

(2)检测条件：将待测样品进行合相色谱-串联质谱检测，根据洗脱峰保留时间、目标化合物定量离子对和定性离子对分离各个洗脱峰，即得到各个手性农药对映体，

a、合相色谱检测条件如下：色谱柱：规格150 mm×3.0 mm，2.5µm的 ACQUITY UPC²Trefoil AMY1柱 ；流动相：超临界CO₂/甲醇，流速：2mL/min；等度洗脱，CO₂和甲醇的体积比为96%:4%； 柱温：40 ℃；背压：1600 psi；进样量：2µL；

b、所述根据洗脱峰保留时间和母离子/子离子的质荷比特征分离各个洗脱峰的方法如下：

保留时间为1.38分钟、定量离子对为284.1/176.1、定性离子对为284.1/252.1的洗脱峰即为R-异丙甲草胺；