[发明专利]抗体及抗体改造方法

权利要求书

1.对抗体的Fab区进行改造的方法，所述方法包括将选自以下的一项或多项突变引入所述Fab区的步骤：

a)重链恒定区1(CH1)中的F170C和轻链恒定区(CL)中的S162C；

b)CH1中的L128C和CL中的F118C；

c)CH1中的F126C和CL中的Q124C；

d)CH1中的V173C和CL中的Q160C；

e)铰链区中的K218E或K218D突变和CL中的E213R或E213K突变，其中根据EU编号对所述抗体重链和轻链进行编号。

2.根据权利要求1所述的方法，其中对所述Fab区引入a)-e)中的1项、2项、3项、4项或5项。

3.根据权利要求1所述的方法，其中对所述Fab区引入a)-d)中的1项或2项，和任选的e)。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述方法还包括将铰链区中的C220突变为除半胱氨酸以外的其它氨基酸或缺失C220，和/或将CL中的C214突变为除半胱氨酸以外的其它氨基酸或缺失C214。

5.根据权利要求4的方法，其中所述除半胱氨酸以外的其它氨基酸选自丝氨酸、丙氨酸和甘氨酸。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述Fab区结合选自以下的抗原的抗体：CD2，CD3，CD3E，CD4，CD11，CD11a，CD14，CD16，CD18，CD19，CD20，CD22，CD23，CD25，CD28，CD29，CD30，CD32a，CD32b，CD33(p67蛋白)，CD38，CD40，CD40L，CD52，CD54，CD56，CD64，CD80，CD147，GD3，IL-1α，IL-1β，IL-1R，IL-2，IL-2R，IL-4，IL-5，IL-5R，IL-6，IL-6R，IL-8，IL-9，IL-12，IL-13，IL-15，IL-17，IL-17R，IL-18，IL-23，干扰素α，干扰素β，干扰素γ，TNF-α，TNFβ，TNF-R1，TNF-RII，FasL，CD27L，CD30L，4-1BBL，TRAIL，RANKL，TWEAK，APRIL，BAFF，LIGHT，VEG1，OX40L，TRAIL受体-1，腺苷受体，淋巴毒素β受体，TACI，BAFF-R，EPO；LFA-3，ICAM-1，ICAM-3，EpCAM，整联蛋白β1，整联蛋白β2，整联蛋白α4/β7，整联蛋白α2，整联蛋白α3，整联蛋白α4，整联蛋白α5，整联蛋白α6，整联蛋白αv，整联蛋白αVβ3，FGFR-3，角质形成细胞生长因子，VLA-1，VLA-4，L-选择素，抗Id，E-选择素，HLA，HLA-DR，CTLA-4，T细胞受体，B7-1，B7-2，VNR整联蛋白，TGFβ1，TGFβ2，嗜酸性粒细胞趋化因子1(eotaxin1)，Blys(B淋巴细胞刺激因子)，补体C5，IgE，因子VII，CD64，CBL，NCA 90，EGFR(ErbB-1)，Her1，Her2/neu(ErbB-2)，Her3(ErbB-3)，Her4(ErbB4)，组织因子，内皮素受体，VLA-4，半抗原NP-cap或NIP-cap，E-选择素，地高辛，胎盘碱性磷酸酶(PLAP)和睾丸PLAP样碱性磷酸酶，转铁蛋白受体，癌胚抗原(CEA)，CEACAM5，HMFG1,PEM，粘蛋白MUC1，MUC18，肝素酶I，人心脏肌球蛋白，肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)，肿瘤相关抗原CA 125，前列腺特异性膜抗原(PSM-A)，高分子量黑色素瘤相关抗原(HMW-MAA)，癌(carcinoma)相关抗原，Gco蛋白Iib/IIIa(GPIIb/IIIa)，表达Lewis Y相关碳水化合物的肿瘤相关抗原，人巨细胞病毒(HCMV)gH包膜糖蛋白，HIV gp120，HCMV，呼吸合胞病毒RSV F，RSVF Fgp，细胞角蛋白肿瘤相关抗原，Hep B gp120，CMV，gpIIbIIIa，HIVIIIB gp120V3环，呼吸道合胞病毒(RSV)Fgp，单纯疱疹病毒(HSV)gD糖蛋白，HSV gB糖蛋白，HCMV gB包膜糖蛋白和产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)毒素，CD133，CD138，OX40，GITR，PD-1，PD-L1，PD-L2，CTLA-4，KIR，LAG-3，TCRα，TCRβ，TCRγ，TCRδ，VEGF，EGF，VEGFR，EGFR，EpCAM，间皮素，Glypicans，Erbl，Erb2，B7-H3，ICOS，BMP1，BMP2，BMP3B，BMP4，CSF1，GM-CSF，FGF1，FGF2，FGF3，FGF4，PDGFR，TIGIT，CS1，TWEAK，CCL1，CCL2，CCL3，CCL13，CXCL1，CXCL2，CXCL3，IP-10，岩藻糖基-GM1，IGF1，IGF2，IGF1R，IGF2R，RANK配体，DLL-4，GM-CSFR，ADAMS，肌生成抑制素，PCSK9，CXCR4，MIF，PEG2。