[发明专利]一种仿生矿化固定化酶和辅因子的制备方法及仿生矿化固定化酶和辅因子在审

专利信息
申请号: 201810321796.9 申请日: 2018-04-11
公开(公告)号: CN108715844A 公开(公告)日: 2018-10-30
发明(设计)人: 高静;姜艳军;周丽亚;曹广秀 申请(专利权)人: 河北工业大学
主分类号: C12N11/14 分类号: C12N11/14
代理公司: 石家庄旭昌知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 13126 代理人: 雷莹
地址: 300000 天津市红桥*** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 辅因子 固定化酶 仿生矿化 酶液 金属盐 制备 沉淀 耐受性 磷酸盐缓冲溶液 仿生矿化法 磷酸根离子 贮藏稳定性 组氨酸标签 介孔结构 金属离子 粒子形貌 负电荷 固定化 再利用 矿物 粒径 洗涤 回收
【权利要求书】:

1.一种仿生矿化固定化酶和辅因子的制备方法,其特征在于包括下列步骤:

S1:将酶液溶于磷酸盐缓冲溶液中,所述酶液中的目的酶带有组氨酸标签,将金属盐和辅因子加入酶液中,得到溶液A;所述金属盐中的金属离子可与所述磷酸根离子形成矿物;所述辅因子带有负电荷;

S2:将所述溶液A混合均匀后在常温下静置,生成沉淀B;

S3:将含有所述沉淀B的溶液A进行离心、洗涤,得到仿生矿化固定化酶及辅因子。

2.根据权利要求1所述的一种仿生矿化固定化酶和辅因子的制备方法,其特征在于所述磷酸盐缓冲溶液为中性或弱碱性。

3.根据权利要求1所述的一种仿生矿化固定化酶和辅因子的制备方法,其特征在于,所述酶液与所述磷酸盐缓冲溶液的体积比为1:8~12,所述金属盐与所述磷酸盐缓冲溶液的摩尔比为1:0.8~1.2,所述辅因子和所述磷酸盐缓冲溶液的摩尔比为1:20~500。

4.根据权利要求1所述的一种仿生矿化固定化酶和辅因子的制备方法,其特征在于所述酶液中的酶为PLP依赖型转氨酶、FAD+依赖型氧化酶和NAD+依赖型脱氢酶中的至少一种,所述辅因子为PLP、FAD+和NAD+中的至少一种。

5.根据权利要求1-4所述的任一项仿生矿化固定化酶和辅因子的制备方法,其特征在于所述金属盐为钴盐、镍盐、铜盐、钙盐中的至少一种。

6.根据权利要求5所述的一种仿生矿化固定化酶和辅因子的制备方法,其特征在于所述金属盐为硝酸钴。

7.一种仿生矿化固定化酶和辅因子,其特征在于所述仿生矿化固定化酶和辅因子由根据权利要求1-6任一项所述的一种仿生矿化固定化酶和辅因子的制备方法制得。

8.根据权利要求7所述的一种仿生矿化固定化酶和辅因子,其特征在于所述仿生矿化固定化酶和辅因子的粒径为9~50μm。

9.根据权利要求7所述的一种仿生矿化固定化酶和辅因子,其特征在于所述仿生矿化固定化酶和辅因子存在介孔结构。

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