[发明专利]雨生红球藻类胡萝卜素及虾青素可视化分析方法

权利要求书

1.一种雨生红球藻类胡萝卜素及虾青素可视化分析方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

1）采用拉曼光谱仪，获取虾青素标准品的谱线；

2）采用步骤1）相同的拉曼光谱仪，相同的操作获取雨生红球藻类待测样本的拉曼光谱原始信息；

3）将步骤2）中获得的拉曼光谱原始信息进行预处理得到谱图信息，在拉曼峰对应的键位C=C拉伸振动处作为类胡萝卜素化学结构的主要敏感标记；

4）利用多元曲线分辨MCR方法并结合交替最小二乘ALS经过50次迭代后解析出几种主要成分，将解析出的主要成分光谱与步骤1）得到的虾青素标准品的拉曼光谱进行对比分析，确定出待测样本内虾青素的成分；

5）结合MCR-ALS算法计算出步骤4）中确定的待测样本内虾青素成分的浓度，通过计算出的比例再结合步骤3）预处理后待测样本拉曼光谱在对应C=C伸缩键处的拉曼峰值强度，计算出待测样本中虾青素应占的强度值，利用得到的强度值进行虾青素成分在细胞内的空间可视化分析；

6）不同时间段，重复步骤1）～5）得到虾青素在细胞内不同时间的成分浓度和空间可视化分析。

2.根据权利要求1所述雨生红球藻类胡萝卜素及虾青素可视化分析方法，其特征在于，所述步骤1）中拉曼光谱仪采用雷尼绍显微共焦拉曼光谱仪，将制好的待测样本切片固定在显微拉曼光谱仪物镜下方载物台上，激光束通过50X的物镜聚焦到样本的表面，其中曝光时间设置为1s，激光强度为1mv，累计次数一次，采样在恒温25℃条件下进行的。

3.根据权利要求1所述雨生红球藻类胡萝卜素及虾青素可视化分析方法，其特征在于，步骤3）预处理具体步骤如下：

首先采用去趋势算法De-trending对拉曼光谱进行预处理，然后采用Renishaw的Wire软件对宇宙射线进行处理，利用Unscrambler对拉曼光谱进行Baseline基线校正，然后再通过卷积平滑方法对拉曼光谱去噪平滑处理。