[发明专利]一种重组褐藻胶裂解酶及其构建方法及应用

权利要求书

1.一种编码褐藻胶裂解酶Aly-Cob的基因，其特征在于，其核苷酸序列具有如下特征之一：

1)如SEQ ID NO.1所示的脱氧核糖核酸序列；

2)编码SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的脱氧核糖核酸序列。

2.一种褐藻胶裂解酶，其特征在于，SEQ ID NO.2从氨基端开始的第1-352或第30-352位氨基酸残基序列。

3.一种制备权利要求2所述的褐藻胶裂解酶的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将褐藻胶裂解酶基因克隆到表达载体中，得到重组质粒；

(2)将重组质粒转化宿主菌，得到产褐藻胶裂解酶的基因工程菌。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的表达载体，是指大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、枯草杆菌表达载体、谷氨酸棒杆菌表达载体、乳酸菌表达载体、链霉菌表达载体、噬菌体载体、丝状真菌表达载体、植物表达载体、昆虫表达载体、或哺乳动物细胞表达载体。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：所述宿主菌，是指包括Escherichiacoli BL21、Escherichia coli JM109或Escherichia coli DH5α在内的大肠杆菌宿主细胞、包括Saccharomyces cerevisiae、Pichia pastoris或Kluyveromyces lactis在内的酵母菌宿主细胞、包括Bacillus subtilis R25、Bacillus subtilis 9920在内的枯草杆菌宿主细胞、包括Corynebacterium glutamicum在内的谷氨酸棒状杆菌、包括Lacticacidbacteria COCC101在内的乳酸菌宿主细胞、包括Streptomyces spp.在内的放线菌宿主细胞、包括Trichoderma viride、Trichoderma reesei、Aspergillus niger、Aspergillusnidulans在内的丝状真菌宿主细胞、包括Bombyx mori，Antheraea eucalypti在内的昆虫细胞，或包括中国仓鼠卵巢细胞CHO、幼小仓鼠肾脏细胞BHK、中国仓鼠肺细胞CHL在内的哺乳动物细胞。

6.一种表达权利要求2所述的褐藻胶裂解酶的基因工程菌。

7.权利要求6所述基因工程菌在发酵产褐藻胶裂解酶中的应用。

8.权利要求2所述的褐藻胶裂解酶在降解褐藻酸盐中的应用，其特征在于，至少具有如下用途之一：

1)用于断裂褐藻酸盐的糖苷键，获得褐藻酸盐寡糖；

2)用于降解红藻或褐藻细胞壁中的褐藻酸盐组分，抽提原生质体。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于：权利要求2所述褐藻胶裂解酶与其他来源的褐藻胶降解酶，或其他种类的酶联合使用后，用于协同降解含有褐藻酸盐的高粘原料。

10.携带权利要求1所述基因的载体或基因工程菌。