[发明专利]一种复合菌剂及其在修复有机氯农药污染水体中的应用

说明书

本发明属于微生物技术领域，公开了一种复合菌剂，其包括如下四种菌：枯草芽孢杆菌、人苍白杆菌、黄孢原毛平革菌、粪产碱菌。本发明选择的菌株之间通过共代谢关系，可以形成高效的代谢降解体系，较单一菌株相比，可以明显提高降解有机氯农药的效率。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种复合菌剂及其在修复有机氯农药污染水体中的应用。

背景技术

有机氯农药是用于防治植物病、虫害的组成成分中含有有机氯元素的有机化合物。主要分为以苯为原料和以环戊二烯为原料的两大类。前者如使用最早、应用最广的杀虫剂DDT和六六六，以及杀螨剂三氯杀螨砜、三氯杀螨醇等，杀菌剂五氯硝基苯、百菌清、道丰宁等；后者如作为杀虫剂的氯丹、七氯、艾氏剂等。此外以松节油为原料的莰烯类杀虫剂、毒杀芬和以萜烯为原料的冰片基氯也属于有机氯农药。常用有机氯农药具有系列特性：①，使用后消失缓慢；②脂溶性强；③氯苯架构稳定，不易为体内酶降解，在生物体内消失缓慢；④土壤微生物作用的产物，也象亲体一样存在着残留毒性，如DDT经还原生成DDD，经脱氯化氢后生成DDE；⑤有些有机氯农药，如DDT能悬浮于水面，可随水分子一起蒸发。环境中有机氯农药，通过生物富集和食物链作用，危害生物。对人的急性毒性主要是刺激神经中枢，慢性中毒表现为食欲不振，体重减轻，有时也可产生小脑失调、造血器官障碍等。文献报道，有的有机氯农药对实验动物有致癌性。氯苯结构较稳定，生物体内酶难于降解，所以积存在动、植物体内的有机氯农药分子消失缓慢。由于这一特性，它通过生物富集和食物链的作用，环境中的残留农药会进一步得到农集和扩散。通过食物链进入人体的有机氯农药能在肝、肾、心脏等组织中蓄积，特别是由于这类农药脂溶性大，所以在体内脂肪中的存储蓄积更突出。蓄积的残留农药也能通过母乳排出，或转入卵蛋等组织，影响后代。

有机氯农药会随着雨水进入到河流和湖泊中，给环境造成污染。目前，采用的处理方法主要包括化学处理和生物修复方法。其中，化学处理方法见效快，但是成本较高，而且容易造成二次污染；生物修复方法比化学处理方法成本低得多，无二次污染，但是对于持续有机氯农药重度污染场地，有机氯农药不易为单一的微生物利用，需要对微生物进行配伍，且受微生物各自营养方式以及代谢方式等影响因素较多，如何混合菌株会出现截然不同的效果，难以获得配伍合理相互协同的复合菌剂，从而无法实现快速移除污染物的效果。中国发明专利“CN107364978A”公开了一种利用纳米铁与白腐菌吸附移除洗脱液有机氯农药的方法，该方法通过降解酶诱导剂增强白腐菌在高浓度表面活性剂的增效洗脱液中的存活和生长，通过营养成分调节，在纳米铁催化作用下，快速降解吐温80、吐温20和曲拉通X100等表面活性剂，在合适的温度等环境下形成对有机氯农药的吸附，在10天内对于高浓度有机氯农药污染土壤洗脱液移除效率达到90％以上。上述方法采用了化学方法辅助生物方法进行处理，效果较好，但是成本偏高，不易于推广使用。目前开发一种成本低廉、高效修复有机氯农药污染水体的复合菌剂是我们需要解决的技术问题。

发明内容

为了克服现有技术的缺陷，本发明的目的是提供一种复合菌剂；还提供了该复合菌剂在修复有机氯农药污染水体中的应用。

本发明是采用如下技术方案实现的：

一种复合菌剂，其包括如下四种菌：枯草芽孢杆菌、人苍白杆菌、黄孢原毛平革菌、粪产碱菌。

具体地，所述复合菌剂的制备方法包括如下步骤：

将枯草芽孢杆菌-人苍白杆菌混合发酵液、黄孢原毛平革菌发酵液、粪产碱菌发酵液按照4-7:2-3:2-3的体积比混合均匀，得到复合菌液；将复合菌液和草炭土按照1-5:1混合搅拌均匀，然后经过冷冻干燥制备成复合菌剂，即得。

优选地，

所述枯草芽孢杆菌-人苍白杆菌混合发酵液的制备方法包括如下步骤：