[发明专利]白雪公主草莓脱毒快繁的方法

说明书

本发明涉及一种白雪公主草莓脱毒快繁的方法，其包括以下步骤：S1、外植体的选取及表面清洗：选取白雪公主草莓葡萄茎的茎尖2～4cm作为外植体，进行表面清洗；S2、灭菌消毒：将经表面清洗过的外植体置于工作台上，进行灭菌消毒；S3、诱导培养：在解剖镜下用解剖针挑取外植体的茎尖0.5mm，接种于诱导培养基上，诱导培养50～60天，得到白雪公主草莓幼苗；S4、病毒检测并选苗：将白雪公主草莓幼苗用病毒试剂盒进行病毒检测，并挑选达标白雪公主草莓幼苗；S5、继代增殖培养：将达标白雪公主草莓幼苗移至增殖培养基中，30天继代一次，继代5～6次；S6、生根培养：将株高3‑5cm的白雪公主草莓小苗移至生根培养基中，培养20～30天，得到白雪公主草莓植株。

技术领域

本发明属于农业育苗技术领域，涉及一种白雪公主草莓脱毒快繁的方法。

背景技术

草莓属蔷薇科草莓属多年生草本植物，是一种重要的经济作物。草莓果肉含有大量蛋白质、糖类及果胶等营养物质，其维生素C含量高于苹果、葡萄等水果，口味酸甜，味道鲜美，深受人们喜爱。除鲜食外，草莓可加工成罐头、果酱、果酒和饮料等制品。近几年，我国草莓生产发展迅速，草莓的面积和产量已跃居世界首位，在促进各地农业增效和农民增收中发挥着重要作用。草莓传统的繁殖方法是利用匍匐茎子苗分株繁殖,分苗繁殖虽然简便易行、成本低廉，但繁殖速度慢,由于种植年限较长,加上连作、以结果母株繁苗等,体内病毒积累逐年增加,病毒病发生严重,造成优良种性退化、品质变劣、产量降低等退化现象。主要表现有：生长缓慢、叶皱缩、品种果实变小、畸形、品质差，一般减产30％-80％并逐年加重，复合侵染时损失更大。在我国已造成损失的草莓病毒病主要有草莓斑驳病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓镶脉病毒、草莓皱缩病毒四种。病毒病已成为草莓主要病害之一,严重阻碍了草莓产业的进一步发展。对于病毒病目前还没有药剂可以治理。因此,培育无病毒母本苗、栽培无病毒苗木是防治草莓病毒病的根本对策。

现有的白雪公主草莓传统的繁殖方法是利用匍匐茎子苗分株繁殖，繁殖速度慢，由于种植年限较长,加上连作、以结果母株繁苗等,体内病毒积累逐年增加,病毒病发生严重,造成优良种性退化、品质变劣、产量降低等退化现象。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种白雪公主草莓脱毒快繁的方法，利用匍匐茎做茎尖剥离组织，通过组织培养技术繁育脱毒草莓种苗，解决当前白雪公主草莓实际生产过程中种苗繁殖慢和种苗带毒的问题，提高白雪公主草莓的产量和品质，培育出的白雪公主草莓脱毒苗具有植株长势强、根系发达、个体生长健壮整齐等优点。

本发明是这样实现的：

一种白雪公主草莓脱毒快繁的方法，其包括以下步骤：

S1、外植体的选取及表面清洗：选取白雪公主草莓葡萄茎的茎尖2～4cm作为外植体，用清洁剂清洗一次，再用水清洗2～3次，然后用吐温清洗一次，之后用流动的水冲洗20～30min；

S2、灭菌消毒：将经步骤S1表面清洗过的外植体置于工作台上，先用无菌水清洗2次，再用75％酒精消毒30s，然后用0.1％升汞消毒3min，在整个灭菌消毒过程中不断搅动，然后用无菌水冲洗5次，外植体消毒完毕；

S3、诱导培养：在解剖镜下用解剖针挑取外植体的茎尖0.5mm，将其接种于诱导培养基上，所述诱导培养基为Ms+6-BA 0.3～0.7mg/L+IBA 0.06～0.14mg/L+蔗糖25g/L，置于25±2℃、黑暗条件下暗培养3天后，移至温度25±2℃、光照2000Lx的培养环境中，光照12h/d，诱导培养50～60天，得到白雪公主草莓幼苗；

S4、病毒检测并选苗：将步骤S3得到的白雪公主草莓幼苗用病毒试剂盒进行病毒检测，并挑选达标白雪公主草莓幼苗；

S5、继代增殖培养：将达标白雪公主草莓幼苗移至增殖培养基中，所述增殖培养基为Ms+6-BA 0.05～1.0mg/L+IBA 0.01～0.2mg/L+蔗糖25g/L，30天继代一次，继代5～6次；