[发明专利]啤酒中酒花苦味酸氧化物葎草灵酮和希鲁酮的检测方法

权利要求书

1.一种啤酒中葎草灵酮和希鲁酮的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

葎草灵酮和希鲁酮参考标样的制备：

将酒花颗粒粉碎后置于50℃-70℃烘箱中高温空气氧化2-4天，得到参考标样；

葎草灵酮和希鲁酮参考标样的定性：

将参考标样用乙醇浸提，利用HPLC进行分析，采集每个色谱峰从200-400nm的紫外吸收光谱，通过对比已定性的葎草灵酮和希鲁酮的紫外吸收光谱定性分析参考标样中的葎草灵酮和希鲁酮，其中，HPLC分析条件为：

流动相:A为0.05％磷酸水溶液，经过滤后超声脱气；B为乙腈，高纯氦脱气；色谱柱：Alltima C18 150mm×4.6mm i.d.，柱温：30℃，检测波长：270nm，进样量：10μL；

梯度洗脱程序如下：

	时间	流速ml/min	％A-0.05％磷酸水溶液	％B-乙腈
1	0.00	1.00	90.0	10.0
2	40.00	1.00	48.0	52.0
3	45.00	1.00	48.0	52.0
4	49.00	1.00	25.0	75.0
5	55.00	1.00	15.0	85.0
6	56.50	1.00	15.0	85.0
7	57.50	1.00	90.0	10.0
8	65.00	1.00	90.0	10.0

啤酒样品前处理：

将啤酒样品充分脱气后，先分别用乙腈和纯水对SPE-C18小柱进行活化，将脱气啤酒经过SPE-C18小柱吸附待测组分，然后依次用A液B液淋洗去除杂质，最后用C液洗脱SPE-C18小柱上的待测组分,得到洗脱液，洗脱液经0.22μm滤膜过滤即可，其中，A液为0.05％磷酸水溶液，B液为体积比70：30的乙腈：磷酸水溶液，C液为体积比90：10乙腈：磷酸水溶液；

啤酒样品中葎草灵酮和希鲁酮的检测：

利用HPLC对啤酒样品进行分析，将啤酒样品中与葎草灵酮和希鲁酮参考标样中经定性分析的峰匹配进行定性分析，同时采用与葎草灵酮结构相似、分子量接近的异α-酸进行相对定量分析，计算得到啤酒中葎草灵酮和希鲁酮的含量。