[发明专利]一种激光微阵列芯片扫描仪的浓度梯度荧光校准片

说明书

本发明提供一种激光微阵列芯片扫描仪的浓度梯度荧光校准片，包括玻璃基片和有机荧光混合液，所述有机荧光混合液呈点阵均布在玻璃基片上，所述有机荧光混合液包括Alexa Fluor 488荧光染料、Cy3‑dCTP荧光染料和稀释液，所述的稀释液为磷酸盐缓冲液或TE缓冲液或水溶液，所述玻璃基片的表面做化学修饰或表面涂覆有高分子膜。所述玻璃基片上的有机荧光混合液点阵由1~8个分点阵组成，且各个分点阵均匀分布排列于玻璃基片上，每个分点阵的有机荧光混合液液滴呈A行×B列排列，所述A和B的取值范围分别为20~40和5~20，本发明的有益效果在于：该浓度梯度荧光校准片制作简单，检测效果突出，生产周期短且成本低廉。

技术领域

本发明涉及生物芯片生产设备技术领域，尤其是涉及用于校准蓝、绿双激光微阵列芯片扫描仪的线性范围、灵敏度和分辨力的一种激光微阵列芯片扫描仪的浓度梯度荧光校准片。

背景技术

随着生物技术的迅速发展，电子技术和生物技术相结合诞生了半导体芯片的兄弟产品——生物芯片，这将给我们的生活带来一场深刻的革命。这场革命对于全世界的可持续发展都会起到不可估量的贡献。我国生物芯片研究始于1997-1998年间，尽管起步较晚，但是技术和产业发展迅速，实现了从无到有的阶段性突破，并逐步发展壮大，生物芯片已经从技术研究和产品开发阶段走向技术应用和产品销售阶段，在表达谱芯片、重大疾病诊断芯片和生物芯片的相关设备研制上取得了较大成就。2008年我国生物芯片市场约为1亿美元，并正以20%以上的速度增长，至2020年生物芯片市场将达到9亿美元。其中，微阵列芯片扫描仪正是用于微阵列芯片扫描的，必不可少的、发挥着极其重要作用的检测仪器。由于扫描仪的光源、光路及检测系统随使用时间的延长会出现细微的变化，这往往会带来测量误差，而荧光检测法对灵敏度极高，在用于痕量检测中时极小的检测误差可能导致完全相反的结论，因此制备浓度梯度校准片用于微阵列芯片扫描仪的校准就显得极为必要。

目前，常用作荧光校准的材料主要有有机荧光材料、聚合物掺杂有机荧光材料、高分子材料、无机材料掺杂有机荧光染料、无机离子掺杂无机固体材料等。无机荧光材料制作校准片操作繁杂、耗时较长、成本较高，而有机荧光材料制作校准片简单快捷、成本低廉。随着生物芯片市场的不断扩大，扫描仪的需求也越来越大，这种制作简单、成本低廉的校准片更加适合推广应用。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：针对现有技术存在的问题，提供一种激光微阵列芯片扫描仪的浓度梯度荧光校准片及制备方法，该方法操作简单、生产周期短且成本低廉。

本发明要解决的技术问题采用以下技术方案来实现：一种激光微阵列芯片扫描仪的浓度梯度荧光校准片，包括玻璃基片和有机荧光混合液，所述有机荧光混合液呈点阵均布在玻璃基片上，所述有机荧光混合液包括Alexa Fluor 488荧光染料、Cy3-dCTP荧光染料和稀释液，所述的稀释液为磷酸盐缓冲液或TE缓冲液或水溶液。

优选地，所述玻璃基片的表面做化学修饰或表面涂覆有高分子膜。

优选地，所述玻璃基片上的有机荧光混合液点阵由1~8个分点阵组成，且各个分点阵均匀分布排列于玻璃基片上，每个分点阵的有机荧光混合液液滴呈A行×B列排列，所述A和B的取值范围分别为20~40和5~20。

优选地，所述分点阵的有机荧光混合液液滴的荧光信号值同一行均相同，且相邻两行呈倍数关系变化。

优选地，所述荧光信号值呈倍数关系是第1行和倒数第1行均为饱和荧光值，第2行~倒数第2行荧光信号值呈正数倍比增加的线性关系，且灵敏度小于或等于13行。

优选地，所述线性关系的相关系数R²﹥0.99，即取每行荧光信号值的中位值作为该浓度单次测量值，以行数对应浓度值的对数值为横坐标、对数对应信号中位值的对数值为纵坐标作图，考察得到曲线的线性关系的相关系数R²，且当R²﹥0.99时，满足线性范围的最低浓度和最高浓度的比值大于或等于10³。