[发明专利]一种香椿茎段组织培养方法

权利要求书

1.一种香椿茎段组织培养方法，其特征在于：按如下步骤进行：

第一步，外植体选取：选择生长健壮的良种母株，在无风晴朗的天气剪取钉梢枝或侧枝，进行冷藏保湿并即刻带回实验室处理；

第二步，外植体处理：采来的植物材料除去不用的部分，将需要的置自来水龙头下，置烧杯中用流水冲洗约1小时，晾干表面的水份，用洁净纸进行包裹；处理后的外植体先用无菌水清洗2~3遍，用75%酒精浸泡30秒，后用无菌水清洗2～3遍，再用0.1%浓度的升汞浸泡20min，再用无菌水清洗4～5遍，备用；

第三步，茎段增殖：在无菌条件下，用镊子夹住消毒处理过的香椿茎段，先用解剖刀将叶片切除，再从发芽点下方约1.5cm左右，上方0.5cm左右进行切断，保留每个茎段1.5～2.0cm长，接入盛有增茎培养基的培养瓶中，每个培养瓶接入2~3个发芽点；将接种的培养瓶置于温度为23～27℃的洁净环境中，在光照时长为14小时/天、光照强度为2000lux～2500lux条件下培养，促进茎段生长；

第四步，侧芽萌发：将生长后变长的茎段进行转接，切取同样长短茎段放入盛有侧芽萌发培养基的培养瓶中，每个培养瓶接2~3个发芽点，接种的培养瓶置于温度为23～27℃的洁净环境中，在光照时长为14小时/天、光照强度为2000lux～2500lux条件下培养，使其从基部接点萌发出侧芽；

第五步，生根壮苗：选择芽体健康，无污染的侧芽或者顶芽，长度为3～4cm长短，放入生根培养基中，在光照强度为2000lux～2500lux，光照时长为14小时/天，培养30天～45天；

第六步，炼苗：种苗在温度15℃～35℃、光照2000lux～20000lux范围条件下锻炼15天～20天后；

第七步，出瓶洗苗：打开瓶口，用镊子将经过炼苗后的幼苗轻轻夹出，用流动的水下进行清洗，洗净根部附着的培养基；

第八步，消毒：将清洗好的幼苗移载到杀菌处理过的土壤中生长。

2.如权利要求1所述的一种香椿茎段组织培养方法，其特征在于：所述的增茎培养基成分按重量组分为：MS培养基为1000份、赤霉素为0.5份混合，再加入NaOH调节PH值为5.8；所述的侧芽萌发培养基成分按重量组分为：MS培养基为1000份、萘乙酸为1份、细胞分裂素为0.5份混合，再加入NaOH调节PH值为5.8；所述的生根培养基成分按重量组分为：MS培养基为500份、吲哚丁酸为1份、蔗糖为30份，再加入NaOH调节PH值为5.8。