[发明专利]人胚胎干细胞的分化有效
| 申请号： | 201810339101.X | 申请日： | 2011-08-17 |
| 公开（公告）号： | CN108517310B | 公开（公告）日： | 2022-02-15 |
| 发明（设计）人： | A.雷扎尼亚 | 申请（专利权）人： | 詹森生物科技公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12N5/0735 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 黄希贵 |
| 地址： | 美国宾夕*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 胚胎 干细胞 分化 | ||
1.一种将多能干细胞分化为定形内胚层细胞的方法，包括使所述多能干细胞在缺乏血清且补充有：BSA；选自胰岛素和IGF-1的因子；和(1)激活素A和Wnt-3A，或(2) GDF-8和14-丙-2-烯-1-基-3,5,7,14,17,23,27-七氮杂四环[19.3.1.1~2,6~.1~8,12~]二十七-1(25),2(27),3,5,8(26),9,11,21,23-壬烯-16-酮的培养基中培养，其中所述培养基补充有1至100ng / ml的胰岛素或1至50ng / ml的IGF-1。
2.如权利要求1的方法，其中所述方法包括培养至少6天的时间。
3.如权利要求1的方法，其中所述方法包括培养1至7天的时间。
4.如权利要求1的方法，其中所述方法还包括在培养之前接种所述多能干细胞单细胞。
5.如权利要求1的方法，其中所述多能干细胞是人多能干细胞。
6.如权利要求5的方法，其中所述人多能干细胞是人胚胎干细胞。
7.如权利要求6的方法，还包括使所述定形内胚层细胞分化成胰腺内胚层细胞。
8.权利要求1的方法，其中所述方法包括在缺乏血清并补充有BSA、激活素A、Wnt-3a和选自胰岛素和IGF-1的因子的培养基中培养所述多能干细胞，其中所述培养基补充有1至100ng / ml的胰岛素或1至50ng / ml的IGF-1。
9.如权利要求8的方法，其中所述培养基补充有50ng / ml至100ng / ml的激活素A。
10.根据权利要求8或9的方法，其中所述培养基补充有10ng / ml至约100ng / ml的Wnt-3A。
11.权利要求1的方法，其中所述方法包括在缺乏血清且补充有BSA、GDF-8、14-丙-2-烯-1-基-3,5,7,14,17,23,27-七氮杂四环[19.3.1.1~2,6~.1~8,12~]二十七-1(25),2(27),3,5,8(26),9,11,21,23-壬烯-16-酮和选自胰岛素和IGF-1的因子的培养基中培养所述多能干细胞，其中所述培养基补充有1至100ng / ml的胰岛素或1至50ng / ml的IGF-1。
12.如权利要求11的方法，其中所述培养基补充有5ng / ml至500ng / ml的GDF-8。
13.如权利要求11所述的方法，其中所述培养基补充有 2.5 μM 的14-丙-2-烯-1-基-3,5,7,14,17,23,27-七氮杂四环[19.3.1.1~2,6~.1~8,12~]二十七-1(25),2(27),3,5,8(26),9,11,21,23-壬烯-16-酮。
14.根据权利要求1,8,9,11或12中任一项的方法，其中所述培养基补充有1至100ng /ml的胰岛素。
15.如权利要求1,8,9,11或12中任一项的方法，其中所述培养基补充有1至50ng / ml的IGF-1。
16.一种细胞群，其通过在缺乏血清且补充有：BSA；选自胰岛素和IGF-1的因子；和(1)激活素A和Wnt-3A，或(2) GDF-8和14-丙-2-烯-1-基-3,5,7,14,17,23,27-七氮杂四环[19.3.1.1~2,6~.1~8,12~]二十七-1(25),2(27),3,5,8(26),9,11,21,23-壬烯-16-酮的培养基中培养多能干细胞获得，其中所述培养基补充有1至100ng / ml的胰岛素或1至50ng /ml的IGF-1。
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