[发明专利]一种孔雀石绿的检测试纸及检测方法

说明书

本发明提供一种孔雀石绿的检测试纸，其特征在于：包括样品垫、金标垫、NC膜、吸收垫与PVC底板，所述的金标垫包括膜和喷涂于膜上的量子点‑抗体复合物。所述的NC膜上喷有检测线和质控线；所述检测线的成分为：MG偶联抗原，浓度为0.15‑0.25mg/m L，用量为0.7‑0.75μL/cm；所述质控线的成分为：兔抗鼠IgG，浓度为0.4‑0.6mg/mL，用量为0.7‑0.75μL/cm。本发明解决了养殖的水产品体内的孔雀石绿残留量的检测灵敏度不高、检测时间较长的问题。

技术领域

本发明涉及一种孔雀石绿的检测试纸及制备方法，具体涉及一种孔雀石绿胶体金免疫层析法对养殖的水产品体内的孔雀石绿的检测方法及检测试纸，属于水产品孔雀石绿的检测领域。

背景技术

孔雀石绿 (malachite green, MG) 是一种绿色的带有金属光泽的结晶体, 易溶于水。由于其具有很好的抗菌效果, 且价格低廉, 常被作为杀虫剂和杀菌剂违规应用于水产养殖业中。孔雀石绿具有潜在的致癌作用, 2002年, 中国《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中被明确列入。在中国《无公害食品水产品中渔药残留限量》 (NY5070—2002) 中也明确指出孔雀石绿为不得检出, 但实际上, 在水产品养殖中还不时能检测到违规添加的孔雀石绿残留。目前, 已报道的孔雀石绿残留检测方法主要有高效液相色谱法(highperformance liquid chromatography, HPLC)、表面增强拉曼散射光谱法 (surfaceenhanced Raman scattering, SERS)、液质联用法、紫外光谱法 (ultraviolet spectrum,UV)、荧光光谱法等, 这些检测方法或灵敏度不高, 或单个样品上机检测时间较长, 或仪器昂贵, 或操作复杂, 不易在基层得到应用与推广。

综上所述，现有技术对养殖的水产品体内的孔雀石绿的检测方法具有以下缺陷：灵敏度不高、检测时间较长、所需的仪器昂贵、操作复杂，不易推广。

发明内容

针对以上现有技术的缺陷，本发明提供一种孔雀石绿的检测试纸及制备方法，并达到以下发明目的：提高对养殖的水产品体内的孔雀石绿的检测灵敏度和准确度，缩短检测时间，降低检测成本，简化操作。

为实现以上发明目的，本发明采用的技术方案如下：一种孔雀石绿的检测试纸包括样品垫、金标垫、NC膜、吸收垫与PVC底板；

所述样品垫：选择摩尔比为1:1的PVP/PBST缓冲液，喷涂于6cm×2.5cm的玻璃纤维素膜，制成样品垫；

所述金标垫：选用J102膜，膜上喷涂量子点-抗体复合物，即CdTe/ZnS QDs-MG复合物，喷涂量为10μl；所述的量子点为：CdTe量子点，所述的抗体为孔雀石绿抗体。

所述的量子点-抗体复合物制备方法为：

将巯基丙酸（MPA）作为稳定剂，制备水溶性CdTe量子点（QDs）。对其进行包壳，得到核壳结构的CdTe/ZnS QDs。将此 QDs 纯化后，与孔雀石绿抗体偶联，制备了量子点-抗体复合物。

所述的NC膜（硝酸纤维素膜）上喷有检测线（T线）和质控线（C线）；

所述检测线为：MG偶联抗原，浓度为0.2mg/m L，用量为0.74μL/cm；

所述质控线为：兔抗鼠IgG，浓度为0.5mg/mL，用量为0.74μL/cm；

孔雀石绿免疫层析试剂条检测孔雀石绿含量的最低检测限为2ppb，检测时间为8min。

具体制作步骤如下：

一、CdTe量子点的制备

(1)NaHTe的制备