[发明专利]乌饭子多糖提取工艺及其应用

说明书

本发明提供了一种乌饭子多糖提取工艺及其应用。提取工艺包括如下步骤：取采集过来的新鲜乌饭子，洗净晾干、冷冻干燥并粉碎后过筛；然后用乙酸乙酯除去乌饭子粉末中的各种单糖及脂溶性色素类物质。以蒸馏水为抽提剂，进行超声波提取，冷冻离心、旋蒸浓缩、低温沉降及洗涤杂质和冷冻干燥后，得到乌饭子多糖。本发明通过单因素实验和Box‑Behnken中心组合响应面试验设计优化乌饭子多糖的提取工艺，筛选出最优提取工艺，并研究乌饭子多糖的抑菌作用。本发明首次对乌饭子多糖的提取工艺及其应用进行研究，方法操作方便，目的产物提取率和纯度较高。乌饭子多糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、红酵母及青霉均具有较强的抑菌、杀菌活性，因而具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于提取分离领域，涉及一种多糖的提取工艺及其应用，特别是涉及一种乌饭子多糖的提取方法，以及该多糖物质的抗菌、抑菌应用。

背景技术

乌饭，又名南烛，拉丁学名为Vaccinium bracteatum Thunb。常绿灌木或小乔木，高2-6米；分枝多，幼枝被短柔毛或无毛，老枝紫褐色，无毛。叶片薄革质，椭圆形、菱状椭圆形、披针状椭圆形至披针形；叶柄长2-8毫米，通常无毛或被微毛。总状花序顶生和腋生，长4-10厘米，有多数花，序轴密被短柔毛稀无毛；苞片叶状，披针形，长0.5-2厘米，两面沿脉被微毛或两面近无毛，边缘有锯齿，宿存或脱落，小苞片2，线形或卵形，长1-3毫米，密被微毛或无毛；花梗短，长1-4毫米，密被短毛或近无毛；萼筒密被短柔毛或茸毛，稀近无毛，萼齿短小，三角形，长1毫米左右，密被短毛或无毛；花冠白色，筒状；花盘密生短柔毛。浆果直径5-8毫米，熟时紫黑色，外面通常被短柔毛，稀无毛。花期6-7月，果期8-10月。乌饭子有很高的药用价值，如：助阳补阴、明目壮肾、养血止血及涩肠固精等功效。

目前，有关乌饭子研究主要集中在乌饭子果酒、乌饭子牛奶饮料、乌饭子果酒等方面的研究。而有关乌饭子多糖的研究尚未见报道。本方法通过优化的乌饭子多糖提取工艺对乌饭子多糖进行提取、制备，并对其抗菌、抑菌作用进行科学评价，对于进一步开发和利用乌饭子这种优质植物资源具有十分重要的意义。

发明内容

本发明提供一种乌饭子多糖提取工艺，以乌饭子多糖得率为评价指标，通过单因素实验和响应面试验设计对超声波辅助提取乌饭子多糖的工艺进行优化，并对乌饭子多糖的抗菌、抑菌作用进行研究。旨在得到乌饭子多糖的最优提取工艺条件和应用范围，为其进一步开发应用提供科学依据。本发明所述的乌饭子多糖的提取工艺包括以下步骤：

（1）原料预处理：取新鲜乌饭子，洗净并晾干表面水后，冷冻干燥后粉碎，过筛，备用；

（2）原料中单糖和色素的去除：在步骤（1）所得的乌饭子粉末中加入与其液料比为10：1（mL/g）的乙酸乙酯，然后通过真空抽滤去除乙酸乙酯溶液，然后将乌饭子粉末进行冷冻干燥；

（3）乌饭子多糖超声提取：在步骤（2）蒸馏水与乌饭子粉末的液料比为（15～35）：1，提取温度为35～75℃，超声波功率为60～300W，超声提取时间为10～50min；超声完成后将反应体系进行离心，得到乌饭子多糖粗提液；

（4）乌饭子多糖粗提液的分离纯化：将步骤（3）制得的乌饭子多糖粗提液进行旋蒸浓缩，然后在4℃低温沉析，真空抽滤并用丙酮和无水乙醇先后缓慢倒入，边抽滤边洗涤多糖沉淀物，最后将所得到的多糖进行冷冻干燥，得到高纯度的乌饭子多糖。

优选的，所述步骤（1）过筛时筛子目数为60目。

优选的，所述步骤（3）提取温度为45℃～65℃；蒸馏水与乌饭子粉末的液料比为20～30：1；超声波功率为120～240W；超声提取时间为30～50min。

优选的，所述步骤（3）中提取温度为64℃；

优选的，所述步骤（3）中乙醇溶液与乌饭子粉末的液料比为25：1；