[发明专利]重组丙型肝炎抗原的制备及应用

说明书

本发明公开了一种重组丙型肝炎抗原的制备及应用，重组丙型肝炎抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，其蛋白结构是可溶性蛋白。编码重组丙型肝炎抗原氨基酸的核苷酸序列，如SEQ ID NO：2所示。所述的重组丙型肝炎抗原的制备方法，将包含SEQ ID NO：2所述的核苷酸序列的宿主细胞进行培养，分离纯化培养所得的多肽或蛋白分子抗原，得到重组丙型肝炎抗原。本发明有助于HCV核心抗原检测的规范化与标准化，可用于制备检测丙型肝炎病毒的试剂盒，有利于弥补现有试剂盒检测HCV灵敏度不足的缺陷。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种重组丙型肝炎抗原的制备及应用。

背景技术

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(HCV)感染引起的传染病之一，在世界范围内流行，全球约有1．7亿人感染了HCV。HCV感染人体后，有将近一半的人会变为慢性肝炎，还可能导致肝纤维化、肝硬化、腹水和肝癌，预后较差。目前诊断丙肝病毒感染的方法有多种，最准确的就是丙肝病毒重组免疫印迹法(HCV—RIBA)和丙肝病毒核糖核酸(HCV—RNA)检测，但是这两种方法操作复杂，实验条件要求严格，且成本高，医院应用较少。实验室传统检测主要是丙肝病毒抗体酶联免疫法，近年来丙肝病毒核心抗原(HCV—eAg)酶联免疫法也广泛应用于临床，主要用于丙肝病毒感染早期诊断。HCV．Ab检测和HCV—cAg检测操作简单，一般实验室即可操作，但可能造成漏诊和误诊。

丙型病毒性肝炎是能够经血液、医疗器械、母婴传播的一种传染性疾病，全球每年有三、四百万的丙型肝炎病毒感染发生。丙型肝炎可发展为肝纤维化、肝硬化甚至肝癌，Shire等悼。的一项研究发现，丙型肝炎病毒是肝癌的主要危险因素，部分地区73．3％的肝癌患者是由于感染HCV而发病。当前，对丙型病毒性肝炎尚无有效的预防和治疗措施，因此，及时准确地检测出丙肝病毒感染，防止HCV传播至关重要。长期以来，实验室检测HCV感染，一般采用HCV．Ab酶联免疫法。该方法简便易操作，实验条件要求低，但可能造成一定的漏诊和误诊。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明通过基因重组技术，分段克隆HCV 核心抗原基因，提供一种重组丙型肝炎抗原及其制备与应用。

一种重组丙型肝炎抗原，其氨基酸序列如如SEQ ID NO ：1 所示，其蛋白结构是可溶性蛋白。

编码重组丙型肝炎抗原氨基酸的核苷酸序列，如SEQ ID NO ：2 所示。

一种宿主细胞，其特征在于，其包含SEQ ID NO ：2所述的核苷酸序列。

所述的重组丙型肝炎抗原的制备方法，将包含SEQ ID NO ：2所述的核苷酸序列的宿主细胞进行培养，分离纯化培养所得的多肽或蛋白分子抗原，得到重组丙型肝炎抗原。

所述重组丙型肝炎抗原在制备丙型肝炎病毒疫苗或丙型肝炎病毒疫苗引起的疾病的治疗制剂或预防制剂中的应用。

所述重组丙型肝炎抗原在制备丙型肝炎病毒诊断制剂或诊断试剂盒中的应用。

有益效果：

本发明克服了现有技术中丙型肝炎病毒检测灵敏度不高，容易出现假阴性结果的缺陷。创造性地发现了上述核心抗原多态性位点的氨基酸片段可作为HCV核心抗原检测的分子标记用于检测丙型肝炎病毒，并且该分子标记的存在能够指示现有的抗原定量检测试剂检测灵敏度降低，有助于HCV核心抗原检测的规范化与标准化，可用于制备检测丙型肝炎病毒的试剂盒，有利于弥补现有试剂盒检测HCV灵敏度不足的缺陷，进一步完善现有技术中的检测丙型肝炎病毒的试剂盒的检测灵敏度和准确度，使之更加广谱有效。

具体实施方式

实施例1