[发明专利]一种检测人尿液中帽柱木碱及其衍生物和代谢物的检测试纸及制备方法

权利要求书

1.一种检测人尿液中帽柱木碱及其衍生物和代谢物的检测试纸，其特征在于，包括样品垫、金标垫、NC膜、吸水纸、底板，所述样品垫、金标垫、NC膜和吸水纸依次粘贴在底板上，所述金标垫上包被有帽柱木碱抗体-胶体金标记物及兔IgG胶体金标记物，所述NC膜上分别包被有帽柱木碱-BSA半抗原、羊抗兔IgG。

2.一种如权利要求1所述的检测人尿液中帽柱木碱及其衍生物和代谢物的检测试纸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)用帽柱木碱抗体-胶体金标记物和兔IgG胶体金标记物浸泡玻璃纤维，之后干燥，得金标垫；

2)在NC膜上分别包被帽柱木碱-BSA半抗原、羊抗兔IgG，干燥后备用；

3)将样品垫、金标垫、NC膜、吸水纸依次粘贴于底板上即得。

3.根据权利要求2所述的检测人尿液中帽柱木碱及其衍生物和代谢物的检测试纸的制备方法，其特征在于，所述帽柱木碱抗体-胶体金标记物由包括以下步骤的制备方法制得：将帽柱木碱抗体加入胶体金溶液中，搅拌，之后加入BSA溶液封闭，然后离心，弃去上清液，沉淀用缓冲液重悬，即得。

4.根据权利要求3所述的检测人尿液中帽柱木碱及其衍生物和代谢物的检测试纸的制备方法，其特征在于，所述帽柱木碱抗体由包括以下步骤的制备方法制得：用帽柱木碱-BSA半抗原注射免疫小鼠，通过细胞融合并对单克隆细胞大量筛选，即得。

5.根据权利要求3所述的检测人尿液中帽柱木碱及其衍生物和代谢物的检测试纸的制备方法，其特征在于，所述缓冲液由以下组分组成：浓度为5-10mmol/L的borate，质量分数为0.1-0.3％的Tween 80；所述缓冲液的pH为8.0。

6.根据权利要求2所述的检测人尿液中帽柱木碱及其衍生物和代谢物的检测试纸的制备方法，其特征在于，步骤2)中帽柱木碱-BSA半抗原的浓度为0.2～1.5mg/ml，所述羊抗兔IgG的浓度为0.5～1.0mg/ml。

7.根据权利要求2或4所述的检测人尿液中帽柱木碱及其衍生物和代谢物的检测试纸的制备方法，其特征在于，所述帽柱木碱-BSA半抗原由包括以下步骤的制备方法制得：

a)将帽柱木碱和丁二酸酐溶于二氯甲醇溶液混匀，冷却至0℃，然后加入三氯化铝，反应2h，得反应液；将所得反应液滴加入冰盐酸溶液中，过滤，收集沉淀，洗涤、干燥，即得帽柱木碱半琥珠酸酯衍生物；所述帽柱木碱与丁二酸酐的质量比为2.5:1；

b)将步骤a)所得的帽柱木碱半琥珠酸酯衍生物溶于DMF，然后加入2-吗啉乙磺酸、N-羟基硫代琥珀酰亚胺，室温反应2小时，得活化的帽柱木碱，将活化的帽柱木碱加入到BSA溶液中，4℃反应过夜，之后用PBS溶液透析即得；所述帽柱木碱半琥珠酸酯衍生物、2-吗啉乙磺酸、N-羟基硫代琥珀酰亚胺的质量比为10:10:5。

8.根据权利要求7所述的检测人尿液中帽柱木碱及其衍生物和代谢物的检测试纸的制备方法，其特征在于，步骤b)中BSA溶液的浓度为10～20mg/ml。

9.一种检测人尿液中帽柱木碱及其衍生物和代谢物的检测试剂盒，其特征在于，包括卡壳和权利要求1所述的检测试纸。