[发明专利]5’-核苷酸酶活性的检测方法及反应动力学定量探测仪

说明书

本申请公开了一种5’‑核苷酸酶活性的检测方法及反应动力学定量探测仪，该探测仪包括：激发光源，用于发射激发光；设有测试样品池和对照样品池的测试转盘，测试转盘连接电机，电机连接控制器；控制器分别连接电机和激发光源，用于控制激发光源发射激发光；分光片设置在激发光源的光路上，用于将激发光源发射的光分光到聚焦镜上，聚焦镜设置在分光片的分光光路上，用于对经过分光片的光进行聚焦，聚焦后的光照射到测试样品池或对照样品池；连接控制器的光电倍增管，用于采集样品受激后的发射光，并转换成电信号再发送给数据处理系统，数据处理系统根据接收的电信号分析测试样品或对照样品的检测浓度。本发明能够方便快捷的检测5’‑核苷酸酶活性。

技术领域

本申请涉及一种检测方法，具体涉及5’-核苷酸酶活性的检测方法及反应动力学定量探测仪。

背景技术

5’-核苷酸酶能够催化AMP(单磷酸腺苷)转变成腺苷(Ade)，其活性直接影响转化速率，也间接决定了对生命体内能量分子之一的AMP直接测量的效率。

现在还没有一种能够方便快捷的检测5’-核苷酸酶活性的方法。

发明内容

由于现实需要，期望提供一种能够方便快捷的5’-核苷酸酶活性的检测方法。

本发明还提供一种用于检测5’-核苷酸酶活性的反应动力学定量探测仪。

为了实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

一种反应动力学定量探测仪，包括：

激发光源，用于发射激发光；

测试转盘，所述测试转盘上设有测试样品池和对照样品池，所述测试转盘通过转轴连接电机，所述电机能够带动所述测试转盘转动和定位，所述电机通过导线连接控制器；

控制器，通过导线分别连接电机和激发光源，用于控制激发光源发射激发光，用于控制电机的转轴转动和定位；

分光片和聚焦镜，所述分光片设置在所述激发光源的光路上，所述聚焦镜设置在所述分光片的分光光路上，所述分光片用于将所述激发光源发射的光分光到所述聚焦镜上，所述聚焦镜用于对经过所述分光片的光进行聚焦，聚焦后的光照射到测试样品池或对照样品池；

光电倍增管，通过导线连接所述控制器，用于采集测试样品池或对照样品池中的样品受激后的发射光，将所述发射光转换成电信号并发送给所述控制器的数据处理系统，所述控制器的数据处理系统根据接收的电信号分析测试样品或对照样品的检测浓度。

所述电机还连接有码盘和码盘计数器，用于测试样品池或对照样品池的定位，所述码盘计数器通过导线连接所述控制器。

所述测试样品池和对照样品池对称设置在所述测试转盘的中心轴线的两侧，所述测试样品池和对照样品池位于所述测试转盘的同一条轴线上。

进一步地，还包括第一滤光片，所述第一滤光片设置在所述激发光源与所述分光片之间。

进一步地，还包括第二滤光片，所述第二滤光片设置在所述光电倍增管与所述分光片之间。

所述激发光源发射的激发光为540nm；所述测试样品池或对照样品池的发射光为590nm。

本发明还提供一种使用上述的反应动力学定量探测仪检测5’-核苷酸酶活性的方法，包括以下步骤：

(1)将AMP单磷酸腺苷、ADA腺苷脱氨酶、PNP嘌呤核苷磷酸化酶、XO黄嘌呤氧化酶、ADHP10-乙酰基-3,7-二羟基吩嗪和HRP辣根过氧化物酶混合，得混合物，所述混合物中各组分的浓度相同；

(2)将所述混合物分成相同的两份，一份加入测试样品池，另一份加入对照样品池。在对照样品池再加入BBS缓冲液30uL；