[发明专利]免电极修饰的微量钾离子含量电化学检测方法

权利要求书

1.一种免电极修饰的微量钾离子含量电化学检测方法，包括以下步骤：

（1）金电极预处理 用超纯水将电极冲洗 3 次，然后将其平放并连接于电化学工作站，吸取 50μL 0.5mol/L的稀硫酸溶液均匀滴加于电极表面，采用循环伏安法扫描，扫描电压范围：-0.3V~0.6V，扫描速度：0.1V/s，扫描 8 次得到稳定的循环伏安图；

（2）在步骤（1）制备的金电极表面均匀滴加25μL钾离子溶液，进行循环伏安法扫描，扫描电压范围：-0.3V~0.6V，扫描速度：0.1V/s，然后再滴加25μL寡核苷酸溶液，反应8分钟后进行循环伏安法扫描，扫描电压范围：-0.3V~0.6V，扫描速度：0.1V/s，得到伏安曲线图；

（3）制备梯度钾离子标准溶液，将步骤（2）前后两次氧化峰电流值的差值与已知梯度钾离子标准溶液，建立电流值的变化量与溶液中钾离子含量的测定模型；

（4）将被测果实用植物汁液提取器将其汁液提取出来，用高纯水稀释后，放入试管中定容至 10mL制备成待测样液，吸取待测样液25μL滴加到经过预处理的电极表面，设置电压为-0.3~0.6 V，采样速度为 0.1V/s，进行循环伏安扫描，然后再将 25μL的寡核苷酸溶液滴加到电极表面，8分钟后进行循环伏安扫描，计算两次扫描的峰电流值，带入模型方程中，计算得出了待测样液的钾离子浓度，再经过浓度转换计算，从而得到待测样液中的钾离子浓度。

2.根据权利要求1所述的免电极修饰的微量钾离子含量电化学检测方法，其特征在于，所述的金电极为DS250BT 型丝网印刷电极，该丝网印刷电极还包括银参比电极以及铂对电极。

3.根据权利要求1所述的免电极修饰的微量钾离子含量电化学检测方法，其特征在于，所述的寡核苷酸溶液的配置步骤如下：

（1）制备Tris-HCl溶液 将 50mL 浓度为0.1mol/L Tris（三羟甲基氨基甲烷、C₄H₁₁NO₃）加到 40.3mL 的 0.1mol/L HCl、pH为7.5的溶液中，再加入 2mmol的 NaCl、0.2mmol的MgCl₂，搅拌均匀后，加高纯水定容至100mL，置于4℃冰箱保存；

（2）将50nmol STP分子信标溶解到（1）制备的溶解到5mmol/L的Tris-HCl溶液中，定容到 500mL，得到溶液1；再取将25nmol IBA寡核苷酸适配体溶解到（1）制备的5mmol/L Tris-HCl溶液中，定容到178.57mL ，得到溶液2，然后将溶液1和溶液2按体积比1：1溶解在一起，室温下孵化 20 分钟，得寡核苷酸溶液。

4.根据权利要求1所述的免电极修饰的微量钾离子含量电化学检测方法，其特征在于，所述的STP分子信标的序列为： FAM-GAGGAGAGAGAGAGATCCTC-BHQ1。

5.根据权利要求1所述的免电极修饰的微量钾离子含量电化学检测方法，其特征在于，所述的IBA寡核苷酸适配体的序列为：

CTCTCTGGTGGTGGGTTGGTGTGTTCTCTCTC。