[发明专利]一种猪繁殖与呼吸综合征病毒鉴别检测用试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 201810352091.3 | 申请日： | 2018-04-19 |
| 公开（公告）号： | CN108611439A | 公开（公告）日： | 2018-10-02 |
| 发明（设计）人： | 袁万哲;王建昌;刘娜;孟令宅 | 申请（专利权）人： | 河北农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12R1/93 |
| 代理公司： | 石家庄国为知识产权事务所 13120 | 代理人： | 林艳艳 |
| 地址： | 071001 河北*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 试剂盒 鉴别检测 繁殖与呼吸综合征病毒 致病型 毒株 种猪 猪繁殖与呼吸综合征病毒 上游引物 下游引物 一次PCR 种毒 应用 | ||
1.一种猪繁殖与呼吸综合征病毒鉴别检测用试剂盒，其特征在于，所述猪繁殖与呼吸综合征病毒为包括经典型和/或高致病型和/或NADC30-like型毒株；所述试剂盒包括上游引物和下游引物，其中
所述上游引物的序列为5′-CTCCTTTGATTGGAATGTTGTG-3′；
所述下游引物的序列为5′-GATGGCTTGAGCTGAGTATTTTG-3′。
2.根据权利要求1所述的猪繁殖与呼吸综合征病毒鉴别检测用试剂盒，其特征在于，所述经典型毒株扩增片段大小为1072bp，所述高致病型毒株扩增片段大小为985bp，所述NADC30-like型毒株扩增片段大小为682bp。
3.根据权利要求1所述的猪繁殖与呼吸综合征病毒鉴别检测用试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括5×反转录缓冲液、dNTP Mixture、反转录酶、RNA酶抑制剂和2×PCR Mix。
4.根据权利要求2所述的猪繁殖与呼吸综合征病毒鉴别检测用试剂盒，其特征在于，所述2×PCR Mix由DNA聚合酶、2×PCR buffer和dNTP Mixture组成。
5.根据权利要求2所述的猪繁殖与呼吸综合征病毒鉴别检测用试剂盒，其特征在于，所述反转录酶为M-MLV反转录酶。
6.根据权利要求2所述的猪繁殖与呼吸综合征病毒鉴别检测用试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括RNA提取试剂。
7.根据权利要求5所述的猪繁殖与呼吸综合征病毒鉴别检测用试剂盒，其特征在于，所述RNA提取试剂包括Carrier RNA、氯仿、异丙醇、75％乙醇。
8.一种非诊断目的的猪繁殖与呼吸综合征病毒的检测方法，其特征在于：用权利要求1～6任一项所述试剂盒对离体待测组织进行经典型、高致病型与NADC30-like型猪繁殖与呼吸综合征病毒的鉴别检测。
9.一种权利要求1～6任一项所述试剂盒在检测含有经典型和/或高致病型和/或NADC30-like型猪繁殖与呼吸综合征病毒的产品中的应用。
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