[发明专利]牛奶中黄曲霉毒素M1高通量酶联免疫试剂盒及其检测方法在审
申请号: | 201810352778.7 | 申请日: | 2018-04-19 |
公开(公告)号: | CN108254560A | 公开(公告)日: | 2018-07-06 |
发明(设计)人: | 骆鹏杰;李敬光;赵云峰;陈霞;蒋双勤;王华丽;刘卿 | 申请(专利权)人: | 国家食品安全风险评估中心;中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577 |
代理公司: | 北京华进京联知识产权代理有限公司 11606 | 代理人: | 王赛 |
地址: | 100022 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 酶标抗体 胎牛血清 浓缩液 封闭溶液 黄曲霉毒素 酶联免疫试剂盒 蛋白稳定剂 脱脂奶粉 高通量 牛奶 底物显色液 包被抗原 酶标板 酶标物 试剂盒 稀释液 检测 包被 | ||
1.一种牛奶中黄曲霉毒素M1的高通量酶联免疫试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括封闭溶液、酶标抗体浓缩液、酶标物稀释液、包被有抗原的酶标板和底物显色液;
所述封闭溶液包括:胎牛血清、脱脂奶粉、蛋白稳定剂,其中,每1000mL所述封闭溶液含有所述胎牛血清32.0~48.0mL、所述脱脂奶粉7.2~10.8g、所述蛋白稳定剂2.4~3.6g;
所述酶标抗体浓缩液包括酶标抗体、胎牛血清和Proclin300,其中,每1000mL所述酶标抗体浓缩液含有所述胎牛血清50~100mL、所述Proclin300100~400μL。
2.根据权利要求1所述的牛奶中黄曲霉毒素M1高通量酶联免疫试剂盒,其特征在于,所述封闭溶液中的蛋白稳定剂为AEP-HBC。
3.根据权利要求1所述的牛奶中黄曲霉毒素M1高通量酶联免疫试剂盒,其特征在于,每1000mL所述封闭溶液还含有:
蔗糖 12.0~18.0g;
Proclin300 240~360μL。
4.根据权利要求1所述的牛奶中黄曲霉毒素M1高通量酶联免疫试剂盒,其特征在于,所述封闭溶液还含有第一磷酸缓冲液,所述酶标抗体浓缩液还包括第二磷酸缓冲液,所述第一磷酸缓冲液和所述第二磷酸缓冲液分别包括Na2HPO4和NaH2PO4;每1000mL所述封闭溶液包含Na2HPO4·12H2O 4.64~6.96g,NaH2PO4·2H2O 0.48~0.72g;每1000mL所述酶标抗体浓缩液包含Na2HPO4·12H2O 2~3g、NaH2PO4·2H2O 0.2~0.8g。
5.根据权利要求1所述的牛奶中黄曲霉毒素M1高通量酶联免疫试剂盒,其特征在于,所述封闭溶液和所述酶标抗体浓缩液还分别包括甘油,每1000mL所述封闭溶液含有所述甘油8.0~12.0mL,每1000mL所述酶标抗体浓缩液含有所述甘油4~10mL。
6.根据权利要求1所述的牛奶中黄曲霉毒素M1高通量酶联免疫试剂盒,其特征在于,所述封闭溶液pH值为7.4。
7.根据权利要求1所述的牛奶中黄曲霉毒素M1高通量酶联免疫试剂盒,其特征在于,所述酶标物稀释液包括牛血清蛋白、Na2HPO4·12H2O、KH2PO4、NaCl和Proclin300,其中,每1000mL酶标物稀释液含有所述牛血清白蛋白3.0~6.0g、Na2HPO4·12H2O 30~50g、KH2PO412~16g、NaCl 3~6g、Proclin300200~400μL。
8.一种使用根据权利要求1~7任一项所述的试剂盒对牛奶中黄曲霉毒素M1的检测方法,包括以下步骤:
S10、对待测牛奶进行样品前处理得到待测样品;
S12、用所述封闭液对包被有包被抗原的所述酶标板进行封闭处理,随后在所述酶标板中加入用所述酶标物稀释液稀释过的所述酶标抗体浓缩液和所述步骤S10的所述待测样品;
S14、用所述底物显色液对所述酶标板进行显色反应;
S16、对所述显色反应的结果进行分析。
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