[发明专利]一种濒危藏药材矮紫堇的组织培养方法

权利要求书

1.一种濒危藏药材矮紫堇的组织培养方法，其特征在于，步骤包括：

(1)选健壮植株芽体，先用乙醇进行快速涮洗，再用HgCl₂溶液进行消毒；

(2)将步骤(1)处理后的芽体采用无菌水进行冲洗，再将芽体表面水吸干，得到无菌外植体，待用；

(3)在无菌条件下，将步骤(2)所述无菌外植体接种到培养基上，先进行暗培养，再转接到丛芽培养基上，光照条件下培养诱导丛芽，形成丛芽；

(4)将所述丛芽转入生根培养基中，在光照条件下，得到生根试管苗；

(5)将所述生根试管苗经练苗移栽到基质中，培养成植株后，定植于野外，直至收获。

2.根据权利要求1所述的濒危藏药材矮紫堇的组织培养方法，其特征在于，步骤(1)中，所述乙醇为体积浓度为60～80％。

3.根据权利要求1所述的濒危藏药材矮紫堇的组织培养方法，其特征在于，步骤(1)中，所述HgCl₂溶液的浓度为0.05～0.2％，采用所述HgCl₂溶液进行消毒的时间为2-4min。

4.根据权利要求3所述的濒危藏药材矮紫堇的组织培养方法，其特征在于，所述HgCl₂溶液的浓度为0.1％。

5.根据权利要求1所述的濒危藏药材矮紫堇的组织培养方法，其特征在于，步骤(2)中，采用无菌水对所述芽体进行冲洗3-5遍。

6.根据权利要求1所述的濒危藏药材矮紫堇的组织培养方法，其特征在于，步骤(3)中，所述培养基为Ms培养基，所述丛芽培养基为Ms+6-BA1mg/l+NAA0.01mg/l培养基。

7.根据权利要求1所述的濒危藏药材矮紫堇的组织培养方法，其特征在于，步骤(3)中，进行所述暗培养的温度为15～20℃，进行所述暗培养的时间为7～10天；

进行所述培养诱导丛芽时，所述培养诱导丛芽的温度为15～25℃，每天所述光照的时间为18-24h。

8.根据权利要求1所述的濒危藏药材矮紫堇的组织培养方法，其特征在于，步骤(4)中，所述生根培养基为1/2Ms+6-BA0.2mg/l+NAA0.5～0.7mg/l或者1/2Ms+6-BA0.2mg/l+IAA0.5～0.7mg/l。

9.根据权利要求1所述的濒危藏药材矮紫堇的组织培养方法，其特征在于，步骤(4)中，所述培养生根的温度为15～25℃，所述光照为1500～2000LX强度光+自然光，每天所述光照的时间为10～12h。

10.根据权利要求1所述的濒危藏药材矮紫堇的组织培养方法，其特征在于，步骤(5)中，所述基质的组成为沙壤土和岩石块按照质量比8:1～12:1组成的混合物；

培养5-6个月后，定植于野外，35-36个月后收获。